[发明专利]一种鱿鱼皮低分子量胶原蛋白肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原蛋白肽的制备方法，尤其是涉及一种鱿鱼皮低分子量胶原蛋白肽的制备方法。          

背景技术

胶原蛋白，或称胶原，是由动物细胞合成的一种生物性高分子，广泛存在于动物骨、腱、软骨和皮肤及其它结缔组织中，具有支撑器官、保护机体的功能。胶原是哺乳动物体内含量最多的蛋白质，约占动物体内蛋白质总量的三分之一。近年来，随着胶原提取技术的发展，对其性质、结构等方面研究的深入，以及对胶原蛋白与胶原多肽的生物功能等性能认识的提高，胶原蛋白的研究及应用成为一个热点。但由于胶原蛋白独特的三股超螺旋结构，性质十分稳定，一般的加工温度及短时间加热都不能使其分解，从而造成其消化吸收较困难，不易被人体充分利用，而将胶原蛋白水解为胶原多肽则其在消化吸收、营养、功能特性等方面都会得到显著的提高。

长期以来，人们都是使用猪、牛的皮和骨提取胶原蛋白，但因疯牛病、口蹄疫等疾病的爆发，使得陆生动物来源的胶原蛋白在应用方面受到了极大限制。而海洋动物含有丰富的胶原蛋白，且生物安全性好，具有很大的开发潜力。

鱿鱼作为我国一种主要的海洋加工原料，加工过程中约有35%的头、足、内脏、表皮等副产物产生，其中鱿鱼皮占8-13%，而鱿鱼皮中胶原蛋白含量约为其干重的70-80%。对于这些副产物的处理，一般企业采用掩埋丢弃的方法或者简单加工做成饲料，这不仅造成资源的极大浪费，更严重的是直接导致环境污染，因此将鱿鱼皮中的胶原蛋白肽提取出来，不仅能够提高企业的经济效益，还能提高鱿鱼的附加值。

例如，中国专利申请公布号：CN102217699A，申请公布日：2011年10月19日，公开了一种鱿鱼皮蛋白活性肽的制备方法，将鱿鱼皮洗净剪成块状，加入NaOH水溶液浸泡2-8d进行脱色，再经水洗至pH中性；加入Ca(OH)₂溶液浸泡2-4d进行固色，再经水洗至pH中性；在55-75℃的pH中性水中处理0.5-1.5h过滤，除去不溶性蛋白，提取得到鱼皮蛋白液；最后，将该液于110-121℃高压处理30～120min，既得鱿鱼皮蛋白活性肽。其不足之处在于，首先该发明需要先将鱿鱼皮在NaOH水溶液中浸泡2-8d进行脱色，再在Ca(OH)₂溶液中浸泡2-4d进行固色，制备周期较长，其次，该发明采用高压处理法处理鱿鱼皮蛋白制备出生物活性肽，制备条件要求严格，制备过程及胶原蛋白的分子量不易控制，另外，该发明是采用PH中性水为蛋白提取剂，蛋白提取率较低。

 

发明内容

本发明是为了克服现有技术所存在的上述的不足，提供了一种制备过程简单易控制，制备周期短，且提取率与纯度高的鱿鱼皮低分子量胶原蛋白肽的制备方法。     

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的一种鱿鱼皮低分子量胶原蛋白肽的制备方法，所述的制备方法包括以下步骤：

（1）将鱿鱼皮清洗后捣碎。捣碎是为了增加鱿鱼皮的体表接触面积，使鱿鱼皮能更好地接触各种溶液，捣碎可用捣碎机直接捣碎或用剪刀剪碎。

（2）在捣碎的鱿鱼皮中加入稀碱溶液，浸泡24-30 h后用水洗涤至pH为中性，再加入正丁醇溶液，搅拌16-24 h后用水洗涤至pH为中性并沥干。加入稀碱溶液浸泡以去除杂蛋白，加入正丁醇溶液以去除脂肪，以提高产物的品质。

（3）在已沥干的鱿鱼皮中加入稀酸溶液，加热至60-90℃，并不断搅拌抽提6-8h，过滤后得到胶原蛋白粗提液。加入稀酸溶液后加热以溶解抽提胶原蛋白。

（4）调节胶原蛋白粗提液pH为7-8后加入复合酶，在超声条件下进行酶解，酶解后灭酶。胶原蛋白肽的分子量越小越容易被人体吸收利用，由于单酶仅能作用于蛋白质分子中特定的肽键，因此采用单一蛋白酶难以获得低分子量的胶原蛋白肽，而通过多种蛋白酶协同作用，可作用于胶原蛋白的不同位点，从而获得低分子量的胶原蛋白肽，超声波具有良好的乳化效应，可以极大降低溶液的张力和粘度、加快非均相体系的混合，使得胶原蛋白与复合酶之间的接触更加均匀与充分，通过超声波与复合酶的协同作用，可以明显提高酶解速度和胶原蛋白肽提取率。

（5）对步骤（4）中所得的酶解液选用分子截留量为1000kd的超滤膜进行超滤，收集滤液。胶原蛋白肽的分子量越小越容易被人体吸收利用，而寡肽的平均分子量为100-860Da，因此选用分子截留量为1000kd的超滤膜进行超滤，可以选择更易被人体所消化吸收的寡肽。