[发明专利]构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法有效
| 申请号： | 201210074108.6 | 申请日： | 2012-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN102618570A | 公开（公告）日： | 2012-08-01 |
| 发明（设计）人： | 黄和;徐晴;李霜;江凌 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12P7/46;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 樊文红 |
| 地址： | 210009 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 构建 产富马酸 大肠杆菌 基因工程 方法 | ||
1.一种构建产富马酸大肠杆菌（Escherichia coli）基因工程菌的方法，以大肠杆菌出发菌株，敲除其TCA循环途径中编码的富马酸酶基因以阻断富马酸至苹果酸的转化途径；以及敲除抑制其TCA循环途径中的TCA循环抑制蛋白基因实现厌氧条件下TCA循环的正常运作，得到可实现厌氧途径下富马酸高效积累的产富马酸大肠杆菌基因工程菌。
2.根据权利要求１所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法，其特征在于还包括以下步骤：敲除富马酸还原酶基因、丙酮酸甲酸裂解酶基因和乳酸脱氢酶基因中的一种或多种。
3.根据权利要求１所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法，其特征在于所述的敲除其TCA循环途径中编码的富马酸酶基因的方法，包括敲除富马酸酶基因的完整基因片段，或者敲除富马酸酶基因的亚基部分。
4.根据权利要求2所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法，其特征在于所述的敲除富马酸还原酶基因的方法，包括敲除富马酸还原酶基因的完整基因片段，或者敲除富马酸还原酶基因的亚基部分。
5.根据权利要求2所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法，其特征在于所述的敲除乳酸脱氢酶基因的方法，包括敲除乳酸脱氢酶基因的完整基因片段，或者敲除乳酸脱氢酶基因的亚基部分。
6.根据权利要求1所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法构建得到的产富马酸大肠杆菌基因工程菌。
7.根据权利要求1所述的构建产富马酸大肠杆菌基因工程菌的方法构建得到的产富马酸大肠杆菌基因工程菌发酵生产富马酸的方法：按体积比1%接种量将构建得到的产富马酸大肠杆菌基因工程菌接种入种子培养基进行有氧种子培养，当OD达到3时，按体积比10%的接种量接种至发酵培养基进行厌氧发酵。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学，未经南京工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210074108.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
