[发明专利]一种增强型肿瘤特异性治疗载体无效
| 申请号： | 201210072573.6 | 申请日： | 2012-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN102618577A | 公开（公告）日： | 2012-08-01 |
| 发明（设计）人： | 黄辰;刘利英;宋土生;许德晖 | 申请（专利权）人： | 西安交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 陆万寿 |
| 地址： | 710049 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 增强 肿瘤 特异性 治疗 载体 | ||
1.一种增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，包括厌氧反应元件和survivin启动子，在survivin启动子的上游还设有CMV增强子。
2.如权利要求1所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的CMV增强子为Enhancer，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。
3.如权利要求1所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的厌氧反应元件为多个串联的厌氧反应元件HRE。
4.如权利要求3所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的多个串联的厌氧反应元件HRE为5个HRE的串联，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。
5.如权利要求1所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的survivin启动子的下游设有包括多克隆位点和PloyA尾的miRNA串联表达框；
所述的多克隆位点至少包括EcoRI、PstI、NheI、kpnI和HindIII酶切位点。
6.如权利要求5所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的多克隆位点之间串联有多个针对肿瘤的管家基因的siRNA或miRNA；其中至少包括沉默肿瘤管家基因ERK1/2的siRNA或miRNA。
7.如权利要求5所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的survivin启动子与miRNA串联表达框之间还设有荧光标记基因，在miRNA串联表达框的下游设有抗生素筛选基因。
8.如权利要求1所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的增强型肿瘤特异性治疗载体为pMD-HRE5-Enhancer-SURV/EmGFP-miR，该载体是在pMD19-T载体的Amp和ori之间依次连接五个串联的低氧反应元件HRE5、CMV增强子Enhancer、survivin启动子、GFP和miRNA表达框架。
9.如权利要求8所述的增强型肿瘤特异性治疗载体，其特征在于，所述的pMD-HRE5-Enhancer-SURV/EmGFP-miR载体的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.4所示。
10.权利要求1或8所述的增强型肿瘤特异性治疗载体在制备抗肿瘤药物的应用。
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