[发明专利]人RNF40基因的用途及其相关药物有效
申请号: | 201210066898.3 | 申请日: | 2012-03-14 |
公开(公告)号: | CN103301474B | 公开(公告)日: | 2017-05-17 |
发明(设计)人: | 朱向莹;孙琴;高博;谢胜华;金杨晟;瞿红花;曹跃琼 | 申请(专利权)人: | 上海吉凯基因化学技术有限公司 |
主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61K31/713;A61P35/00;A61P11/00;C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 上海光华专利事务所31219 | 代理人: | 许亦琳,余明伟 |
地址: | 200233 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | rnf40 基因 用途 及其 相关 药物 | ||
1.分离的人RNF40基因在制备或筛选肺癌、胶质瘤之任一肿瘤治疗药物中的用途。
2.一种降低肿瘤细胞中人RNF40基因表达的分离的寡核苷酸分子,所述寡核苷酸分子包含:
a)双链RNA,所述双链RNA中含有能够在严紧条件下与人RNF40基因杂交的核苷酸序列;
或者
b)shRNA,所述shRNA中含有能够在严紧条件下与人RNF40基因杂交的核苷酸序列;
所述双链RNA包含正义链和反义链,所述正义链和所述反义链互补,并且所述反义链与人RNF40基因中靶序列的转录产物互补;所述shRNA包括正义链片段和反义链片段,以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构,所述正义链片段和所述反义链片段的序列互补,并且所述反义链片段的序列与人RNF40基因中靶序列的转录产物序列互补;所述人RNF40基因中靶序列,为SEQ ID NO:7所示序列。
3.如权利要求2所述的分离的寡核苷酸分子,其特征在于,所述茎环结构的序列选自以下任一:UUCAAGAGA、AUG、CCC、UUCG、CCACC、CTCGAG、AAGCUU和CCACACC。
4.如权利要求2所述的分离的寡核苷酸分子,其特征在于,所述双链RNA为小干扰RNA,该小干扰RNA的序列如SEQ ID NO:21-22所示。
5.如权利要求2所述的分离的寡核苷酸分子,其特征在于,所述shRNA的序列含有SEQ ID NO:9所示序列。
6.一种人RNF40基因干扰慢病毒载体,为含有编码权利要求2-5任一权利要求所述分离的寡核苷酸分子中的shRNA的基因片段的慢病毒载体,能表达所述shRNA。
7.如权利要求6所述的慢病毒载体,其特征在于,所述慢病毒载体还含有编码肿瘤细胞中可被检测的标记物的核苷酸序列。
8.如权利要求7所述的慢病毒载体,其特征在于,所述可被检测的标记物为绿色荧光蛋白。
9.如权利要求8所述的慢病毒载体,其特征在于,所述慢病毒载体选自:pLKO.1-puro、pLKO.1-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-tGFP、pLKO.1-CMV-Neo、pLKO.1-Neo、pLKO.1-Neo-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-TagCFP、pLKO.1-puro-CMV-TagYFP、pLKO.1-puro-CMV-TagRFP、pLKO.1-puro-CMV-TagFP635、pLKO.1-puro-UbC-TurboGFP、pLKO.1-puro-UbC-TagFP635、pLKO-puro-IPTG-1xLacO、pLKO-puro-IPTG-3xLacO、pLP1、pLP2、pLP/VSV-G、pENTR/U6、pLenti6/BLOCK-iT-DEST、pLenti6-GW/U6-laminshrna、pcDNA1.2/V5-GW/lacZ、pLenti6.2/N-Lumio/V5-DEST、pGCSIL-GFP或pLenti6.2/N-Lumio/V5-GW/lacZ中的任一。
10.一种人RNF40基因干扰慢病毒,由权利要求7-9任一权利要求所述慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装而成。
11.一种用于预防或治疗肿瘤的药物组合物,所述药物组合物中含有如权利要求2-5中任一所述的分离的寡核苷酸分子或权利要求10所述的人RNF40基因干扰慢病毒。
12.权利要求11所述药物组合物在制备治疗肺癌或胶质瘤的肿瘤治疗药物中的应用。
13.一种分离的人RNF40基因的RNA干扰靶序列,为SEQ ID NO:7所示序列。
14.权利要求13所述的人RNF40基因的RNA干扰靶序列在制备治疗肺癌、胶质瘤的肿瘤治疗药物中的应用。
15.一种用于降低肿瘤细胞中的人RNF40基因表达的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:存在于容器中的,根据权利要求2-5中任一所述的分离的寡核苷酸分子或权利要求10所述的人RNF40基因干扰慢病毒。
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