[发明专利]一种喹乙醇代谢物半抗原制备方法及其应用

权利要求书

1.一种喹乙醇代谢物半抗原，为式(1)所示产物：

式1

2.式(1)所示产物的制备方法，包括如下步骤：

(1)取0.38g MQCA，0.20g氨基丁酸及少量DMAP加入20mL干燥的DMF；

(2)0℃条件下缓慢滴加0.8g DCC于5mL干燥的DMF混合液中，滴加完毕后自然升温至室温，继续反应40h；

(3)蒸除溶剂，柱层析纯化后得到MQCA与氨基丁酸的缩合物，即为式(1)所示产物。

3.一种喹乙醇代谢物抗原，是将式(1)所示产物和载体蛋白偶联得到的偶联物。

4.权利要求3所述喹乙醇代谢物抗原的制备方法，包括如下步骤：

方法一：

(1)将30mg喹乙醇半抗原，充分溶解于1mL DMF中；

(2)称取载体蛋白50mg，使之充分溶解在3mL pH 7.2的PBS中，将喹乙醇半抗原溶解液逐滴缓慢滴加到该载体蛋白溶液中得溶液A；

(3)称取12.5mg EDC，用1mL水溶解后缓慢于室温下加入A中，搅拌24h；

(4)用0.01mol/L PBS透析3d，每天换2次透析液，以除去未反应的小分子物质。以12000rpm离心30min，收集上清，分装，于-20℃保存备用。

方法二：

(1)将20mg喹乙醇半抗原用1.0mL DMF溶解，冷却至10℃，加入氯甲酸异丁酯15μL，10℃搅拌反应30min，即可得到反应液A。

(2)称取载体蛋白36mg，使之充分溶解在2.6mL 50mmol/L碳酸钠溶液中，将反应液A逐滴缓慢滴加到该溶液中。

(3)10℃反应4h，然后4℃过夜。

(4)用0.01mol/L PBS透析3d，每天换2次透析液，以除去未反应的小分子物质。以12000rpm离心30min，收集上清，分装，于-20℃保存备用。

5.权利要求3所述喹乙醇代谢物抗原在制备喹乙醇代谢物特异性抗体中的应用。

6.应用权利要求3所述喹乙醇代谢物抗原制备得到的特异性抗体。

7.权利要求6所述抗体在检测喹乙醇代谢物中的应用。

8.应用权利要求1所述产物、权利要求3所述喹乙醇代谢物抗原、权利要求6所述特异性抗体制备得到的酶联免疫检测试剂盒。

9.权利要求8所述酶联免疫检测试剂盒，其特征在于它含有：包被有包被原的酶标板、酶标二抗、喹乙醇代谢物特异性抗体浓缩液、喹乙醇代谢物系列标准品、底物显色液、终止液、复溶工作液、浓缩洗涤液。