[发明专利]具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的蛋白质及其编码基因和应用有效
| 申请号: | 201210065384.6 | 申请日: | 2012-03-13 |
| 公开(公告)号: | CN102586208A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
| 发明(设计)人: | 周志刚;张宇婷;姚斌;杨雅麟;李映红;霍凤敏;徐俐;李青 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/11;A23K1/165 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
| 地址: | 100081 北京市海淀区中*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 乙酰 氨基 葡萄 糖苷酶 活性 蛋白质 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种蛋白质,为如下(a)或(b)或(c):
(a)序列表中序列1自N末端第23至883位氨基酸残基组成的蛋白质;
(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(c)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶功能的由序列1衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于:它为如下1)或2)或3)或4)的DNA分子:
1)序列表中序列2自5’末端第第67至2649位核苷酸所示的DNA分子;
2)序列表中序列2所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子;
4)与1)或2)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体为将权利要求2或3所述基因插入载体pET28a(+)的多克隆位点得到的重组质粒。
6.如权利要求4所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌为将权利要求4或5所述重组表达载体导入大肠杆菌得到的重组菌。
7.一种制备权利要求1所述蛋白质的方法,包括如下步骤:
(1)培养权利要求6所述重组菌并在培养过程中加入IPTG进行诱导;
(2)将完成步骤(1)的培养体系离心收集沉淀,超声破碎后收集上清液即为含有权利要求1所述蛋白质的溶液。
8.扩增权利要求2或3所述基因全长或其任意片段的引物对。
9.权利要求1所述蛋白作为β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的应用。
10.权利要求1所述蛋白在制备饲料中的应用。
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