[发明专利]用于同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒的多重PCR检测引物

权利要求书

1.一套用于检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒的多重PCR检测引物，其特征在于：所述引物包括三对引物，其中，所述的用于犬瘟热病毒检测的引物序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；所述的用于犬细小病毒检测的引物序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；所述的用于I型和II型犬腺病毒检测的引物序列为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。

2.一种检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒的方法，其特征在于包括以下步骤：

配制25μLPCR反应体系：10X Ex Buffer 2.5μL、dNTPs 2μL、Ex Taq DNA聚合酶0.25μL、CDV-N1和CDV-N2各0.35μL、CPV-NS1和CPV-NS2各0.35μL、CAV-E31和CAV-E32各0.65μL、CDV模板0.75μL、CPV模板0.75μL、CAV-I模板0.75μL、CAV-II模板1.5μL、灭菌ddH₂O 13.5μL；

其中，引物CDV-N1和CDV-N2用于犬瘟热病毒的检测，其序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；引物CPV-NS 1和CPV-NS2用于犬细小病毒的检测，其序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；引物CAV-E31和CAV-E32用于I型和II型犬腺病毒的检测，其序列分别为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示；

PCR反应程序：94℃预变性5min；94℃变性30S，55℃退火30s，72℃延伸1min，共30个循环；72℃延伸10min；

观察：取5μL PCR产物，经1％琼脂糖凝胶电泳，于凝胶成像系统观察结果。

3.一种用于检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒的试剂盒，其特征在于包含权利要求1所述的引物。

4.权利要求1所述的引物在制备检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒单一感染或混合感染试剂中的应用。

5.权利要求2所述的试剂盒在制备检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒单一感染或混合感染试剂中的应用。