[发明专利]蚕蛹生产α-亚麻酸、蚕蛹蛋白和蚕蛹多肽的生产技术

权利要求书

1.一种蚕蛹的综合利用方法，以蚕蛹为原料，使用有机溶剂提取出蚕蛹毛油，精制后采用尿素包埋和分子蒸馏相结合的技术，提取出纯度达到85％以上的蚕蛹α-亚麻酸，再以脱脂蚕蛹粉为原料制取蚕蛹蛋白并进一步加工成蚕蛹多肽。其特征在α-亚麻酸提取、蚕蛹蛋白提取和水解工序，具体操作如下：

1)原材料预处理当原料为新鲜蚕蛹、缫丝后含水蚕蛹时，首先将蚕蛹在80℃的烘箱中干燥，除去其中可见杂物后，用粉碎机粉碎，制成蚕蛹粉，过40目筛备用。

2)蚕蛹毛油浸提将预处理后的蚕蛹粉置于提取罐中，加入4～10倍量的有机溶剂，在温度为50～80℃的情况下，浸提时间为1～3小时，浸提次数为2～4次。

3)蚕蛹毛油精制浸提步骤结束后，过滤收集、合并滤液，回收溶剂，得到蚕蛹毛油。将蚕蛹毛油放入分离罐中，加入1～3倍量的稀碱溶液，常温搅拌1～3小时，静置，待油水分离后从分离罐下方放出稀碱溶液，得到精制蚕蛹油。

4)蚕蛹脂肪酸的制备称取精制蚕蛹油1份，加入4.0％氢氧化钠乙醇溶液5份，置于反应罐中，于60～75℃搅拌反应1～3小时，静置至室温，加水至溶液澄清透明，用盐酸调pH为2～3，于分离罐中用3份正己烷萃取，弃水层，水洗油层至中性。油层经无水硫酸钠脱水后于40～50℃回收正己烷，即得混合脂肪酸。

5)尿素包埋将3～5尿素加入8～12份甲醇中，65℃水浴中搅拌使溶解，加入一份脂肪酸，搅拌60分钟混匀，取出冷至室温。在-10～-25℃静置包合16～364时，取出后迅速减压抽滤，滤液用10％盐酸调至pH3.0，转移至分离罐中，用2～3倍量正己烷萃取，弃水层，水洗油层至中性，油层用无水硫酸钠脱水后，于40～50℃回收正己烷，即得纯度达70％以上的α-亚麻酸。

6)分子蒸馏使用刮膜式分子蒸馏设备，采用多级操作方式，蒸馏温度95℃～110℃，操作压力0.3Pa～2.0Pa，进料温度60℃，进料速率85mL/h～95mL/h，刮膜器转速150r/min。经过四级分子蒸馏，可以将α-亚麻酸的纯度由原来的70～75％提纯至85～95％。

7)蚕蛹蛋白提纯 取一份脱脂后的蚕蛹粉，加入10份pH值为8.5的碱性溶液，在65～75℃加热搅拌5～10h。提取结束后，过滤，得蚕蛹蛋白溶液。用稀盐酸调节至pH 4.5，此时立即出现絮状沉淀，置于4～10℃中静置12小时后，用滤布过滤，收集沉淀，加入2倍量pH6.0的缓冲液，加入双氧水，在60～70℃搅拌2～4小时后，加热煮沸10分钟，重复上述调节pH、静置、过滤、收集沉淀步骤，干燥后得精制脱臭蚕蛹蛋白。

8)蚕蛹蛋白水解 取一份精制脱臭蚕蛹蛋白，加入10份缓冲液，搅拌均匀后再加入蛋白水解酶，在40～55℃保温搅拌4～6小时。水解反应结束后加热煮沸10分钟，冷却到室温后过滤、浓缩、干燥，得水溶性蚕蛹多肽粉。

2.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，其特征在于原材料是新鲜蚕蛹、干燥蚕蛹以及缫丝后的蚕蛹。

3.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，蚕蛹毛油浸提工艺中使用的有机溶剂，是乙醇、石油醚、丙酮及其混合物。

4.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，蚕蛹毛油精制步骤中，所用的稀碱溶液为浓度为0.1～0.3mol/L的氢氧化钠、碳酸钠和碳酸氢钠溶液。

5.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，分子蒸馏步骤中，使用的是刮膜式分子蒸馏设备，采用多级操作方式，蒸馏温度95℃～110℃，操作压力0.3Pa～2.0Pa，进料速率85mL/h～95mL/h。

6.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，蚕蛹蛋白提纯工序中，使用的pH8.5的溶液包括Tris-盐酸缓冲液、Tris-甘氨酸缓冲液、Tris-醋酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液。

7.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，蚕蛹蛋白提纯工序中，双氧水的终浓度为2.0～10.0％。

8.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，蚕蛹蛋白水解工序中，使用的蛋白酶包括胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶。

9.根据权利要求1所述的蚕蛹的综合利用方法，提取罐包括搪瓷提取罐、不锈钢提取罐、搪玻璃反应罐。