[发明专利]东亚钳蝎蝎毒中的GPCR活性多肽及其提取分离和应用

权利要求书

1.一种东亚钳蝎蝎毒中的GPCR活性多肽，其特征在于：

为下述活性多肽之一，

BmK-YA该多肽由Tyr-Gly-Gly-Tyr-Met-Asn-Pro-Ala-amide组成的八肽；

或，基于BmK-YA的序列改造的GPCR活性多肽Phe⁴-BmK-YA，该多肽的序列为Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Asn-Pro-Ala-amide。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于：该多肽的C-端被酰胺化，多肽BmK-YA分子量870.3088Da。

3.一种权利要求1所述多肽的提取分离方法，其特征在于：该多肽是从东亚钳蝎蝎毒中分离得到的，具体过程为，

a.将东亚钳蝎蝎毒上样至C18固相萃取柱进行固相萃取，先用含体积浓度0.1％TFA的体积浓度5-10％乙腈淋洗，然后用含体积浓度0.1％TFA的体积浓度20-60％乙腈洗脱，将洗脱液冻干；

b.将上述冻干样品采用反相色谱进行第一维分离，

采用含体积浓度0.05％TFA的乙腈水溶液线性梯度洗脱，0-50min：线性洗脱过程洗脱液中乙腈的体积浓度由2-10％乙腈升至20-40％乙腈，收集馏分，当洗脱剂乙腈的体积浓度为14％-16％时收集到的馏分为活性馏分；

c.将上述活性馏分进一步用亲水色谱进行第二维分离，流动相为：纯水(A)，乙腈(B)，100mM磷酸三乙胺缓冲盐(C)，线性梯度洗脱过程洗脱液中流动相C的体积浓度一直维持2-20％不变；0-60min：线性梯度洗脱过程洗脱液中流动相A的体积浓度由5-10％变化为30-40％，流动相B的体积浓度由93-70％变化为68-40％，且线性梯度洗脱过程洗脱液中流动相A+B+C的体积浓度等于100％，当洗脱液中的水含量为22％-24％的时候收集得活性多肽。

4.一种权利要求1所述多肽作为活性组份在制备镇痛药中的应用。

5.根据权利要求4所述多肽的应用，其特征在于：该多肽能够作用于μ-，δ-和κ-阿片受体，其中对δ-阿片受体的活性最高，临床上可作为镇痛药应用。