[发明专利]胰腺癌易感基因无创检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及生物医学和生物技术，具体涉及一种胰腺癌易感基因检测试剂盒，根据检测结果从基因水平评估胰腺癌发病的风险级别，并作为预防和治疗胰腺癌的方向指导。

背景技术

胰腺癌是一种常见的恶性肿瘤，占全部恶性肿瘤的2％。约95％的胰腺癌为导管细胞腺癌，其具有恶性度高，早期诊断率低，疗效欠佳，预后差等特点，病死率接近100％，总体5年期生存率小于5％。据世界卫生组织公布的统计资料，近年来，胰腺癌的发病率在全球范围内呈逐年上升趋势，2008年全世界新发胰腺癌病例278684例，发病率为3.9/10万，2010年全世界新发胰腺癌病例达293541例，增加5.06％。在我国，胰腺癌的发病率也呈逐年上升趋势，其标化病死率在10年间(1991-2000年)从1.46/10万增长到2.38/10万，增加了近1倍。2008年，我国新发胰腺癌病例44217例，发病率为2.8/10万，可以判断，随着世界人口的迅速增长和年龄的日趋老龄化，胰腺癌必将成为威胁人类健康的主要疾病。

引起胰腺癌的危险因素很多，研究表明其主要因素为两类：遗传因素和环境因素。遗传方面，可能与基因突变、基因多态性、表观遗传学等因素引起的遗传易感性提高有关。

最近的研究表明，胰腺癌的发生与XPC、MTHFR、CYP2E1、GSTT1四个遗传易感基因密切相关。XPC全称xeroderma pigmentosum，complementation group C，即着色性干皮病基因组C，它是核苷酸切除修复系统的重要成分，与HHR23B形成复合物，在切除修复初始阶段发挥识别DNA损伤的功能。一旦DNA修复功能出现异常，细胞恶性转化的概率也将增加。XPC蛋白水平表达的高低是影响细胞损伤识别的关键因子之一。存在DNA损伤修复缺陷的个体，对癌症的易感性增加，这可能与基因组不稳定性的增加有关。XPC缺陷可导致遗传不稳定性的发生，从而致使胰腺癌的发生。PAT多态是XPC第9号内含子的多个AT双核苷酸的插入缺失多态，其具有3种基因型：PAT(未缺失)、PAT(杂合缺失)、PAT(纯和缺失)，对中国人群关联分析报道，PAT(纯和缺失)和PAT(杂合缺失)型患者其DNA损伤修复能力降低，基因组稳定性下降，抵抗致癌物质的能力降低，大大增加了胰腺癌的发病风险。因此，XPC基因PAT单核苷酸多态性位点可作为胰腺癌发病的风险预测因子和指针之一。

MTHFR的全称为5，10-methylenetetrahydrofolate reductase(NADPH)，是亚甲基四氢叶酸还原酶蛋白编码基因。MTHFR作为一种还原酶，可将叶酸代谢通路中的5，10-亚甲基四氢叶酸转化为5-甲基四氢叶酸，从而有利于叶酸生物学功能的发挥。此外，由于叶酸代谢通路与同型半胱氨酸代谢通路耦联，因此，MTHFR酶活性的正常发挥有利于保持血液中的同型半胱氨酸水平，不至于出现高同型半胱氨酸血症，为DNA甲基化和蛋白质甲基化提供甲基。此外叶酸的中间代谢产物在核苷酸合成过程中也有重要的作用，通过一碳单位代谢为嘌呤环的形成提供碳原子。MTHFR基因的缺陷将导致机体多个基础生化途径的紊乱，包括细胞周期调控、DNA复制、DNA甲基化修饰等，由此将引发癌症、心脑血管等多种病症。研究发现，MTHFR C677T单核苷酸多态性位点与胰腺癌患病风险有关，当叶酸摄入和吸收水平高时，677T/T和677C/T基因型人群患胰腺癌风险较低，这两类基因型被视为胰腺癌保护基因，而677C/C基因型人群在MTHFR酶耐热性较强，不利于dUMP转变为dTMP，容易造成DNA损伤，胰腺癌发生风险明显增强。