[发明专利]一种顺铂超分子胶束前药的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及纳米医药技术领域，具体地说是一种顺铂超分子胶束前药的制备方法。

背景技术

顺铂(顺式二氯二氨合铂，CDDP)是1965年由美国科学家Rosenborg等人发现的第一个具有抗癌活性的金属配合物。它是一种广谱的抗肿瘤化合物，可抑制癌细胞的DNA复制过程，并损伤其细胞膜上结构，对卵巢癌、宫颈癌、睾丸癌、乳腺癌、食道癌、非小细胞肺癌和胃癌等，具有疗效确切，抗癌活性高等特点。然而，顺铂低的水溶性，重度消化道反应、骨髓抑制、听神经毒性，尤其易对肾脏造成不可逆损伤等限制了其临床疗效的进一步提高。

经过对现有技术的检索可以得出，将顺铂通过化学键载于生物相容性良好的聚谷氨酸衍生物上，不但降低了顺铂的毒性，而且提高了抗癌活性（Biomaterials, 27(2006), 5958-5965）。Kataoka等将顺铂与聚乙二醇-聚谷氨酸（PEG-b-Glu）两嵌段共聚物组装成纳米胶束，顺铂的载药量得到提高，可达30%左右，顺铂纳米胶束药物对裸鼠实体瘤模型的治疗效果良好，显示出较好的临床应用前景（Cancer Research, 63 (2003) 8977-8983）。

发明内容

本发明的目的是提供一种顺铂超分子胶束前药的制备方法，该方法利用β-环糊精与金刚烷之间的高络合常数，分别将二者引入两种高分子链段，组装形成非共价键接超分子胶束，制得的胶束粒径为50～150nm、粒径分布窄、在血液中能长效循环。

本发明的目的是这样实现的：

一种顺铂超分子胶束前药的制备方法，包括以下具体步骤：

a、制备金刚烷封端聚乙二醇单甲醚（mPEG-Ad）

先将端氨基聚乙二醇单甲醚（mPEG-NH₂）溶解于干燥1，2-二氯乙烷中，1g mPEG-NH₂对应5～10ml 1，2-二氯乙烷，加入1-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡啶，mPEG-NH₂与1-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶、吡啶的摩尔比为1∶5∶5∶5，氮气保护下，加热至50～100 ℃，保温8小时，浓缩，在无水乙醚中沉淀，过滤，真空干燥得白色粉末金刚烷封端聚乙二醇单甲醚（mPEG-Ad）；

b、制备6-位氨基化的β-环糊精（β-CD-NH₂）   

将β-环糊精与N-溴代丁二酰亚胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，1g β-环糊精对应5～10ml二甲基甲酰胺，β-环糊精与N-溴代丁二酰亚胺、三苯基膦的摩尔比为1∶14∶14，氮气保护下，加热至60～100 ℃，保温10小时，制得6位全溴代的β-环糊精（β-CD-Br）；用干燥二甲基甲酰胺溶解β-CD-Br，1g β-CD-Br对应10～20ml二甲基甲酰胺，加入叠氮化钠，β-CD-Br与叠氮化钠的摩尔比为1∶10，氮气保护下，加热至50～100 ℃，保温24小时，得6位全叠氮化的β-环糊精（β-CD-N₃）；将β-CD-N₃溶于干燥二甲基甲酰胺，1gβ-CD-N₃对应10～20ml二甲基甲酰胺，加入10～20个当量的三苯基膦还原制得6位全氨基化的β-环糊精（β-CD-NH₂）；

c、制备β-环糊精-谷氨酸聚合物（β-CD-PGL₅）

将β-CD-NH₂与L-谷氨酸-苄酯环内酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，1gβ-CD-NH₂对应50～100ml二甲基甲酰胺，β-CD-NH₂与L-谷氨酸-苄酯环内酸酐的摩尔比为1∶35，通氮气保护，30～50℃保温48小时，制得β-环糊精-谷氨酸苄酯聚合物（β-CD-PBLG₅）；用干燥二甲基甲酰胺溶解，1g β-CD-PBLG₅对应20～50ml二甲基甲酰胺，加2mol/L氢氧化钠溶液，在室温下搅拌48小时脱去苄酯制得β-环糊精-谷氨酸聚合物（β-CD-PGL₅）；其中：β-CD-PBLG₅与NaOH摩尔比为1∶100；

d、组装顺铂超分子胶束前药（mPEG-Ad/β-CD-PGL₅-CDDP）