[发明专利]一种胸腺法新化合物及其新制法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胸腺法新化合物及其新制法，通过该新制法可以得到高纯度的胸腺法新，属于医药技术领域。

背景技术

胸腺法新(Thymosin α1，也称胸腺肽α1)是胸腺素主要的生物活性成分，为体内重要的免疫调节物质，是氮端乙酰化的28个氨基酸组成的多肽，按干燥品计算，含胸腺肽α1(C₁₂₉H₂₁₅N₃₃O₅₅)不少于95.0％。研究表明，胸腺法新促进骨髓干细胞发育分化为原淋巴细胞及前淋巴细胞；诱导T淋巴细胞分化与成熟，使已成熟的T细胞进一步分化为几个不同的亚群，如杀伤细胞、记忆细胞、效应细胞、辅导T淋巴细胞等，并产生各种可溶性介质；增强淋巴细胞对有丝分裂素的反应，并可增加淋巴组织的蛋白质和核酸的合成；增加r-IFN、a-IFN、IL-2、IL-3和淋巴毒素的生成，增强抗病毒和抗肿瘤的免疫反应；抑制自身免疫反应；恢复抑制性T细胞的功能。目前胸腺法新已被广泛应用于临床，治疗多种疾病，如用于慢性乙型肝炎的治疗；用于丙型肝炎、肝细胞癌、恶性黑色素瘤的治疗；用于治疗感染性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等的治疗。

CN 1390853A公开了一种制备胸腺肽的工艺方法，其步骤如下：对新鲜的胸腺匀浆液加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液，以抑制酶活性；在10℃以下用超声波，匀质机或超细技术对新鲜的胸腺组织进行处理，以破碎细胞；冷冻离心，得离心液经截流分子量为6000-10000的超滤柱进行超滤，得粗制品；应用纳滤技术，将超滤液浓缩10倍以上。但是这种工艺要经过一段时间的微波加热，势必会破坏其中胸腺肽的活性。

CN 101921331A公开了一种胸腺肽的制备方法，其步骤为：用pH 3.5-4.0的缓冲液将胸腺洗涤干净，再加入pH 3.5-4.0的缓冲液低温匀浆，制备胸腺匀浆液；得到的匀浆液经过热变性离心除去杂蛋白，然后用盐酸调节上清液pH至4.5-5.0，再次离心，调节上清液pH值至中性；得到的中性上清液经过不同的滤膜过滤，除去杂质和细菌，冻干，得到胸腺肽成品。这种方法制备的胸腺肽步骤多，工艺复杂，制作成本高，不适合工业化生产。

CN 101602802A公开了一种胸腺法新脱盐的工艺，其是使用离子交换的方法脱去胸腺法新样品的盐分，其工艺步骤为：将胸腺法新溶液调节pH至酸性，再将酸化后的胸腺法新溶液与阳离子交换树脂混合，用水洗脱离子交换树脂；再用碱性溶液洗脱交换树脂，收集在230nm波长处有吸收的洗脱液，浓缩干燥，得脱盐胸腺法新。该方法只是将盐洗脱，为简单的洗脱方法，并不改变其纯度，实用性不大。

可以看出，现有技术的方法或者步骤繁多，不适合工业生产；或者收率较低，耗费了大量的原料，造成成本高昂，或使用了毒性溶剂，造成药物的毒性残留，影响了制剂产品质量。

另外，虽然目前获得的胸腺法新最高纯度可以达到99.6％甚至更高一点，但这只能通过特殊的纯化方式获得，一般制备或提取方法获得的胸腺法新例如由于生产工艺控制不当等原因纯度并不高，因而也不适合直接使用，而且即使纯化后的胸腺法新若存放不当或存放时间过长时，也会导致药物活性成分含量降低，色泽加强，有关物质的含量升高，特别是若有高分子杂质，会出现致敏性和不明生理反应。因此有必要对不合格的产品或粗品进一步进行纯化，以提供高纯度的化合物。本领域迫切需要研究出一种低成本、纯化度高、适用于大规模制备胸腺法新的方法。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种胸腺法新化合物的纯化方法，不使用昂贵和有害的试剂以及苛刻的反应参数和条件，工艺简单，产品纯度高，毒性溶剂残留低，易于工业化生产，进而也能够提高制剂产品质量，减少毒副作用。

本发明人经过长期认真的研究，经过组合应用特定的方法并优化参数后，意外发现了一种纯化胸腺法新的方法，获得理想的纯度。本发明提供的精制方法所针对的胸腺法新是目前已知的合成方法所制得的胸腺法新粗品或者市售的胸腺法新原料药或其过期产品，以下也可称为原料胸腺法新。

具体而言，为了提高原料胸腺法新(或其粗品)的纯度，本发明提供一种纯化胸腺法新的方法，包括以下步骤：

步骤1，将胸腺法新粗品溶解于醇类溶剂或三氟乙酸中，加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液，加入活性炭吸附，过滤，收集滤液，减压浓缩，获得一次浓缩液；

步骤2，将上述浓缩液用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，依次用板框和滤膜过滤，然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩，获得二次浓缩液；