[发明专利]用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及葡萄皮白藜芦醇的分离方法，特别是采用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法。

背景技术

在1940年首次发现白藜芦醇，20世纪70年代首次发现葡萄中含有这种物质，后来人们发现虎杖、花生、桑椹等植物中也含有这种成分。天然白藜芦醇是一种天然活性成分，它能以游离态(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)2种形式在植物(如中药材虎杖)中分布及生物合成，且均具有抗氧化效能，其中反式异构体的生物活性强于顺式，是葡萄中的一种重要的植物抗毒素。人们对其自然资源进行了广泛的研究，目前至少在21个科、31个属的72种植物中发现了白藜芦醇，如：葡萄科的葡萄属、蛇葡萄属，豆科的落花生属、决明属、槐属，百合科的藜芦属，桃金娘科的桉属，蓼科的蓼属等。含白藜芦醇的许多植物是常见的药用植物，如决明、藜芦、虎杖等，有的就是食物，如：葡萄。葡萄皮中白藜芦醇的含量最高，可达50～100mg/kg。

白藜芦醇(化学名为芪三酚)是含有芪类结构的非黄酮多酚类化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化、抗自由基、保护肝脏、保护心血管和抗心肌缺血等功能，其中，最令人瞩目和最有发展前景的是抗肿瘤作用，被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物。进行抗癌药物类白藜芦醇的开发与应用研究，首先要获得大量高纯度的白藜芦醇。

目前报道的白藜芦醇的提取纯化方法有有机溶剂萃取法、双水相萃取法、柱层析法、高速逆流色谱法。由于葡萄皮浸膏成分复杂，而其白藜芦醇含量过低，所以浸取和萃取是白藜芦醇分离的基础步骤，要想得到高纯度的白藜芦醇，须进一步纯化。进一步纯化的方法常采用柱层析法、结晶法。无论是低压正相柱层析还是高压反相柱层析，层析柱色谱所固有的柱效低、不连续性、成本高等不足依然存在，而结晶法要求有较高的含量。

查阅相关文献，中国专利公开(公告)号：CN1351985名称为“一种白藜芦醇的生产工艺及其在食品饮料葡萄酒中的运用”。此项公开是白藜芦醇的生产工艺，特征在于将葡萄皮经分选去杂、漂洗、粉碎、95％乙醇提取、乙醇浸膏、酒石酸溶解、乙醚萃取酸溶液、乙醚萃取液减压浓缩、乙醚提取物、硅胶柱层析、收集丙酮、氯仿洗脱液(1∶1)、洗脱液浓缩、乙醇重结晶，生产出葡萄皮白藜芦醇；中国专利公开(公告)号：CN102304028A名称为“一种分离纯化虎杖中白藜芦醇的方法”。此项公开的内容特征在于：用丙酮-水作为提取剂，在提取液中所提液中加入亲脂性溶剂，构成丙酮-水-亲脂性溶剂组成的三元两相液-液萃取系统，富集了白藜芦醇的亲脂性溶剂减压浓缩，放置析出白藜芦醇；中国专利公开(公告)号：CN102250969A名称为“从虎杖中制备高纯度白藜芦醇的工艺”。此项公开的内容特征在于用高温酵母+糖化酶为专用微生物使虎杖白藜芦醇的类似物转化成虎杖甙或白藜芦醇，再用低温酵母使虎杖甙转化成白藜芦醇，用乙酸乙酯或乙酸丁酯萃取，用氧化铝柱层析纯化，最后重结晶的99％白藜芦醇；中国专利公开(公告)号：CN102320934A名称为“一种从虎杖根茎中提取白藜芦醇的新方法”。此项公开内容的特征在于：虎杖根茎加醇回流提取，提取液浓缩至无醇，加酸和稳定剂加热水解，水解液调PH至中性，静置析出晶体。以上四项公开的内容是用有机溶剂萃取法、柱层析法、结晶法纯化白藜芦醇，有机溶剂萃取法、柱层析法、结晶法自身固有的不足依然存在。

模拟移动床色谱分离技术近年来发展非常迅速，很多专利文献报道了模拟移动床色谱法分离手性药物，如光学异构体、外消旋物质和对映体，以及二甲苯异构体的分离。其中US5,518,625专利文献涉及了心得安，氨酰心安和3一氯一苯一1一丙醇的手性分离。德国德雷斯顿药品工业有限公司在中国专利局申请了用模拟移动床色谱分离法制取高纯环苞菌素的专利。日本代科化学株式会社和日产化学工业株式会社开发了模拟移动床法分离甲羟戊酸内酯类化合物技术。中国鞍山科技大学开发了模拟移动床色谱分离卡波前列腺甲酯和生物药物替考拉宁技术以及富勒烯C₆₀的模拟移动床色谱分离方法。但是，对于葡萄皮白藜芦醇的模拟移动床色谱分离方法仍未见公开报道。

发明内容

本发明提供了一种用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法，以提高白藜芦醇产品纯度和收率。

本发明提供的用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法包括以下步骤：

1原料选择：用醇提法得到的葡萄皮浸膏，白藜芦醇质量百分比含量10％。

2以甲醇水溶液为流动相，用模拟移动床进行纯化。

2.1设备及条件选择