[发明专利]一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物化学领域，尤其涉及一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法。

背景技术

多糖是自然界最丰富的存在物质，由单糖残基以共价键键合而成。多糖硫酸酯是多糖衍生物，由多糖分子链单糖残基的某些羟基被硫酸根取代而形成，其中，分子量和单糖残基硫酸根取代度(DS)是最重要的2项理化参数。多糖硫酸酯药学活性十分广泛，具有抗凝血、抗血栓、抗病毒、降血脂和抗肿瘤等活性。1987年原联邦德国的Beyer与Hoechst公司合作，人工合成硫酸化木聚糖用于艾滋病的治疗。硫酸化右旋糖酐钠盐(Dextran sulfate sodium)已是临床治疗II a及II b型高血脂症和保护血管内皮的药物。

多糖硫酸酯大致可分成两类，一类是天然的硫酸化多糖，如动物糖胺聚糖、褐藻多糖硫酸酯、卡拉胶等。此类药物需通过分离、纯化获得，来源有限，提纯工艺复杂，价格昂贵，产品质量不易控制。另一类是人工半合成产物，通过简单分离获得丰富的天然多糖，经硫酸酯化结构修饰获得多糖硫酸酯，制备工艺简单，产品成本低，易通过控制反应条件合成出符合预期分子结构的产物。人工合成硫酸化多糖的方法很多，多糖构型不同，合成的方法不同，吡喃型多糖一般采用Wolfrom法，呋喃型多糖采用Nagasawa方法。

茯苓系多孔菌科药用真菌茯苓(Poria cocos(Schw.)Wolf)的干燥菌核，我国药典记载茯苓性味甘、淡、平，归心、肺、脾、肾经，具有利水渗湿，健脾宁心之功效，用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠。茯苓主要成分为碱溶性多糖，含量高达90％以上，为近似直链的β-1，3葡聚糖，开发利用茯苓多糖资源具有重大意义。本发明将氨基磺酸作为磺化试剂，对茯苓多糖进行硫酸化反应。本发明方法和目前普遍应用的SO₃-吡啶为磺化试剂的Wolfrom法相比，具有反应工艺简单、工艺成本大大降低、安全系数高、磺化效率高、副反应小等显著优点。由于工艺环节减少制作SO₃-吡啶危险步骤，大大简化制备工艺和增加工业化的安全系数。初步药效学实验结果表明茯苓多糖硫酸酯具有很强的抗凝血活性。

氨基磺酸(ASA，aminosulfonic acid)是重要的精细化工产品，由尿素与发烟硫酸或氯磺酸作用而得，广泛应用于金属和陶瓷制造的多种工业设备和民用设施的清洗剂、石油处理剂，以及染料医药工业用磺化试剂等各个领域中。氨基磺酸可以制成极纯的常温时稳定的结晶体，其水溶液具有与盐酸、硫酸同等的强酸性，别名固体硫酸。

氨基磺酸分子结构式

氨基磺酸作为磺化试剂广泛用于有机合成反应之中，与伯醇一起加热时容易生成硫酸二甲酯及氨。与苯酚、萘分别反应时可生成苯酚磺酸、萘酚磺酸铵。与其他高分子胺类(如脂肪酰胺等)容易反应，制成水溶性化合物。

发明内容

本发明的目的是提出一种成本较低且品质更好的一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法。

为了实现上述目的本发明采用如下技术方案：

一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于：

包括以下步骤：

(1)、茯苓去皮、干燥、粉碎，分3-5次溶于总体积为其10-15倍的0.5mol/LNaOH中，每次均在4-10℃浸提多糖5-10h，合并浸提所得上清液，用10％左右的醋酸将上清液中和至pH6-8，4-10℃下沉淀过夜，低温离心收集沉淀，去离子水洗涤沉淀3-5次，再用无水乙醇、丙酮和乙醚依次洗涤，70-90℃干燥，得白色茯苓多糖，研成粉末待用；

(2)、在旋转蒸发仪的反应瓶中加入氨基磺酸和有机溶剂，预热至反应温度80℃左右，氨基磺酸完全溶解后加入步骤(1)所得的干燥的茯苓多糖粉末，多糖和有机溶剂的料液比g∶mL＝1-20∶100，氨基磺酸和茯苓多糖的单糖残基的摩尔比为2-5∶1，反应温度70-95℃，反应体系抽真空，旋转搅拌反应0.2-5小时，转速60-150rpm；

(3)、反应结束后，冷却至室温，用饱和碱溶液调反应液pH到9-10，继续抽真空除氨，当pH值显著下降至6.5以下后，再加碱溶液调pH到9-10，再抽真空，如此反复2-10次，直至反应液无氨气味、pH值维持在7以上为止；