[发明专利]仔猪水肿病毒素亚单位灭活疫苗的制备方法无效

专利信息
申请号: 201210047056.3 申请日: 2012-02-28
公开(公告)号: CN102580071A 公开(公告)日: 2012-07-18
发明(设计)人: 杜元钊;郭玉广;邹敏;马爽;程增青;冯阳;王福军;李金积;郭莉莉;孙健 申请(专利权)人: 青岛易邦生物工程有限公司
主分类号: A61K39/08 分类号: A61K39/08;A61P31/04
代理公司: 北京君智知识产权代理事务所 11305 代理人: 郑明
地址: 266032 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 仔猪 水肿病 毒素 单位 疫苗 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种预防仔猪水肿病的stx2e毒素亚单位疫苗的制备方法,其特征在于主要包括一下几个步骤:

(1)生产用种子制备将冻干的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)EDQD株菌种接种SB液体培养基,接种固体琼脂平板,挑取典型菌落若干,经PCR鉴定毒素基因合格后,即可用于接种,该菌株已于2011年11月22日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为CGMCC No.5484;

(2)菌液培养采用发酵培养法培养菌液,菌液经管式离心机离心,菌泥按0.1g/ml比例重新悬浮于生理盐水中;

(3)毒素提取对重悬菌液进行超声波裂解,加入40%饱和度硫酸铵,经连续流离心机离心,弃沉淀,上清中继续加入度硫酸铵至60%饱和度,经连续流离心机离心,沉淀重悬与原菌液体积1/20,经戊二醛溶液灭活后,置2~8℃保存备用;

(4)按常规矿物油佐剂灭活疫苗的方法配制成矿物油佐剂亚单位疫苗。

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