[发明专利]气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法无效

专利信息
申请号: 201210046953.2 申请日: 2012-02-28
公开(公告)号: CN102621262A 公开(公告)日: 2012-08-01
发明(设计)人: 王军娟;张民;黄成刚 申请(专利权)人: 杭州博圣生物技术有限公司
主分类号: G01N30/88 分类号: G01N30/88
代理公司: 杭州之江专利事务所(普通合伙) 33216 代理人: 朱枫
地址: 310007 浙江省杭州市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 色谱 检测 有机酸 方法
【权利要求书】:

1.气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法,包括如下步骤:1,对待检尿液样本完成尿酶处理;2,加入内标品,采用冷冻乙醇进行沉淀蛋白的处理,将样本吹干;3,对上述样本进行甲基硅烷化衍生处理;4,采用上述1-3的步骤处理标准有机酸,得到标准有机酸样本;5,采用气相色谱-质谱联用仪对标准有机酸样本和待检尿液样本进行检测;6,以标准有机酸样本的检测结果作为参比曲线,用常规算法对待检尿液样本的有机酸进行定量。

2.如权利要求1所述的气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法,其特征在于:步骤5中的检测流程是这样的:采用分离模式进样,色谱柱:DB-5ms,进样口温度:250℃,柱温箱初温:100℃,保持4分钟,以4℃/min速率升温至250℃保持16分钟;He气流速:1.1ml/min;溶剂延迟:5分钟;离子源模式:+El;离子源温度:200℃;四极杆温度:150℃;调谐模式:自动调谐Auto tune;质荷比范围30m/z到600m/z,扫描周期0.4s,样本分析时间60min;计算机系统记录色谱和质谱图形,应用之前各有机酸标准品建立的客户定性谱库做定性匹配,并采用已有参比鉴定的定量曲线校正方法进行定量。

3.如权利要求1所述的气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法,其特征在于:步骤2中所述的内标品含有十七烷酸(MGA),托品酸(IS-2),二十四烷酸(C24),重量比例如下:十七烷酸(MGA)35~45%;托品酸(IS-2)15~25%;二十四烷酸(C24)35~40%,混合为浓度为1.2-1.8mg/ml的水溶液。

4.如权利要求1所述的气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法,其特征在于:步骤4中的标准有机酸包括甲基琥珀酸,尿嘧啶,3-甲基戊二酸,5-氧合脯氨酸,2-羟基马尿酸,2-羟基异己酸,癸二酸,马尿酸,其浓度均为0.6-1.0mg/ml。

5.如权利要求1所述的气相色谱-质谱检测尿有机酸的方法,其特征在于:检测结束后用质控品重复步骤1、2、3、5,从而校正标准有机酸的参比曲线,所述的质控品中包括如下重量比的成分:甲基琥珀酸10~20%,尿嘧啶8~12%,3-甲基戊二酸10~20%,5-氧合脯氨酸15~25%,2-羟基马尿酸10~20,2-羟基异己酸5~10%,癸二酸5~10%,马尿酸8~12%;将各标准品混合后制成冻干粉而得,使用时复溶为浓度为0.7-1.0mg/ml的水溶液。

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