[发明专利]热淋清颗粒和头花蓼的薄层色谱指纹图谱的测定方法

权利要求书

1.头花蓼药材指纹图谱的测定方法，其是照薄层色谱法测定，包括以下步骤：

(a)薄层点样液制备：称取头花蓼药材粉末，加水超声处理，过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酸萃取液蒸干，残渣用乙酸乙酯使溶解，作为头花蓼供试品溶液；以及任选地分别制备芦丁、槲皮苷和没食子酸的对照品溶液；

(b)薄层层析：采用聚酰胺薄层板，取上述供试品溶液和任选的对照品溶液点样于薄层板上，用体积比为7∶6.5∶2.5∶3的正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸混合液作为展开剂进行展开；

(c)显色：向挥干的薄层板上喷以显色液AlCl₃试液，挥尽薄层板上的残余溶剂，置320nm的紫外光灯下检视荧光薄层色谱，得到头花蓼药材的指纹图谱。

2.根据权利要求1的方法，其中步骤(a)中，所述头花蓼供试品溶液是用如下方法配制的：取头花蓼药材粉末，至容量瓶中，加水适量，超声处理，放冷，用水定容至刻度，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取，使乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，即得供试品溶液。

3.根据权利要求1的方法，其中步骤(a)中超声处理是以功率250W、频率33kHz的条件超声处理15～60min。

4.根据权利要求1的方法，其中步骤(a)中，所述头花蓼供试品溶液是用如下方法配制的：取头花蓼药材粉末2g，至25mL容量瓶中，加水25mL，以功率250W、频率33kHz超声处理30min，放冷，用水定容至刻度，滤过，滤液用乙酸乙酯萃取3次，每次25mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加5mL乙酸乙酯使溶解，即得供试品溶液。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(a)中，还包括分别制备芦丁、槲皮苷和没食子酸的对照品溶液的操作，其步骤是：分别精密称取干燥至恒重的芦丁、槲皮苷、没食子酸对照品适量，用甲醇制成浓度分别为0.5±0.05mg/mL、0.1±0.02mg/mL、0.1±0.02mg/mL的对照品溶液。

6.根据权利要求1的方法，其中步骤(b)中，点样液的体积为2～10μL、点样液点样于距薄层板底边10mm处、和或展开距离为7～15cm。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(b)中，使用体积比为7∶6.5∶2.5∶3的正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸混合液进行二次展开。

8.根据权利要求1的方法，其中步骤(b)中，所述展开是在双槽展开箱的一侧加入上述展开溶剂进行预平衡，温度20℃，相对湿度至小于88％的条件下进行的。

9.根据权利要求1的方法，其中步骤(b)是以如下方式操作的：采用聚酰胺薄层板，取供试品溶液、对照品溶液各4μL，用半自动点样仪点于距薄层板底边10mm处；用体积比为7∶6.5∶2.5∶3的正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸混合液作为展开剂；在温度20℃、相对湿度至小于88％的条件下于双槽展开箱的一侧加入上述展开溶剂预平衡15min，上行展开，展距8cm；用体积比为7∶6.5∶2.5∶3的正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸混合液作为展开剂进行二次展开，即可。

10.根据权利要求1的方法，其中步骤(c)中，所述检视可以是肉眼观察、照相处理和/或扫描仪扫描。

11.根据权利要求1的方法，其中还包括步骤(d)对薄层色谱图进行分析：包括5个共有峰/斑点的薄层色谱指纹图谱所对应的药材可初步判定为头花蓼药材正品，无5个共有峰/斑点则可判定为伪品。

12.根据权利要求11的方法，其中步骤(d)中，如果药材的第3、4号峰/斑点与芦丁显示的峰/斑点对应，则可初步判定该药材为头花蓼药材正品，否则可判定为伪品。

13.根据权利要求11的方法，其中步骤(d)中，如果药材的第4号峰/斑点与槲皮苷显示的峰/斑点对应，则可初步判定该药材为头花蓼药材正品，否则可判定为伪品。

14.根据权利要求1的方法，其中步骤(d)中，如果药材的第3、4号峰/斑点与芦丁显示的峰/斑点对应，并且第4号峰/斑点与槲皮苷显示的峰/斑点对应，则可初步判定该药材为头花蓼药材正品，否则可判定为伪品。