[发明专利]一种高效价人破伤风免疫血浆及其制备工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种血液制品原料及其制备方法。具体涉及一种高效价人破伤风免疫血浆及其制备工艺。

背景技术

破伤风主要是由于破伤风杆菌通过破损的皮肤和黏膜(如伤口、骨折、烧伤、木刺或锈针刺伤等)而侵入人体，并在伤口深部缺氧环境中生长繁殖，产生大量破伤风杆菌外毒素作用于神经系统，引起全身特异性感染。此类破伤风也叫伤后破伤风，其潜伏期不规律，一般5-10天，个别达20天以上，通常创伤部位越靠近神经中枢，潜伏期愈短，病情也愈重；此外还有一种特殊的破伤风，是由于新生儿断脐所致，俗称脐风、撮口，因其常在断脐后7日左右发病，故又称“七日风”。

破伤风杆菌是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌，广泛存在于土壤和草食动物的粪便中，对环境有很强的抵抗力。与其他病原菌不同，破伤风杆菌或其产生的外毒素在伤口均不产生明显的病理改变，它是通过分泌外毒素并扩散致全身而导致发病，其外毒素对神经有特别的亲和力，经吸收后分布于骨髓、脑干等处。因其产生的外毒素毒力强，发作快而易危及生命，因此必须及时治疗。马血清破伤风抗毒素(Tetanus Antitoxin，TAT)和人破伤风免疫球蛋白(Human Tetanus Immunglobulin，TIG)能预防创伤后破伤风的发生，在给患者注射后，患者体内立即获得了抗伤风的抗体，能特异的中和破伤风毒素，使其失去毒性作用。

马血清破伤风抗毒素是采集经破伤风类毒素免疫马所得的血浆，经胃酶消化后纯化制成的液体抗毒素球蛋白制剂。人类应用马血清抗毒素防治破伤风历史已近百年，在我国使用也长达半个多世纪，该方法成功挽救了无数人生命，但马血清蛋白对人体有很强的过敏原性，故马血清抗毒素常常引起下列两类过敏反应：一是过敏性休克，即注射过和注射后数分钟至一小时内，患者突然感到胸闷、气急、脉搏细数速、血压下降、发冷，直至神志昏迷。重者抢救不及，可迅速死亡。此系I型过敏反应，即人体曾注射或接触过马血清；二是血清病(Serum Sikness)，即注射TAT后1-2周出现荨麻疹、发热、淋巴结肿大，脸部浮肿，偶有蛋白尿、呕吐及关节疼痛。有的可延时很长，可能发展成过敏性脑炎及其他神经炎。此系III型过敏反应。因此使用TAT时必须做皮试，皮试阴性者，注射时仍有可能发生过敏反应。大量临床资料表明，TAT引起过敏反应率真为5％-30％，其中约1/10万的致死率。为此，上世纪60年代欧美各国相继研制出TIG用于临床，并逐渐取代TAT。

人破伤风免疫球蛋白是采集经乙肝疫苗免疫后再经破伤风类毒素(Tetanus Toxoid，TD)免疫的供血浆者中具有高效价破伤风抗体的血浆，经低温乙醇分离法提纯，并经病毒灭活处理的特异免疫球蛋白，用于防治破伤风。目前，人破伤风免疫球蛋白已广泛应用于临床并逐渐取代TAT。由于TIG是人源性产品，人体接种后不会发生超敏反应，作用安全，在体内存留时间长，预防和治疗效果都优于马血清。该类产品尤其适用于对马血清严重过敏者。

作为人破伤风免疫球蛋白生产原料的破伤风免疫血浆，尤其是高效价的免疫血浆无疑处于举足轻重的地位。由于免疫程序不尽合理、病毒灭活工艺落后加上血源安全性得不到保障等原因，导致国内破伤风免疫血浆大多存在效价低、安全性难以保证等诸多不足，优质破伤风免疫血浆的生产能力十分有限，已成为了制约破伤风人免疫球蛋白产量的主要瓶颈。

在血浆的病毒灭活方面，目前国内血液制品厂家大多采用以下几种，然而单一灭活法均不能得到令人满意的效果：比如BMM膜法能有效除去绝大部分病毒，但其在处理大分子量样品时易堵塞，并且不能保下完全去除B19病毒，缺乏经济实用性；干热处理法能有效灭活脂包膜和非脂包膜病毒，但对B19病毒无效，并且在温度控制和产品质量方面有很高的要求；酸孵放法也仅适用于丙种球蛋白。S/D法对脂包膜病毒的灭活很有效，相对来说灭活病毒效果较彻底，但近年有报道只用S/D方法进行病毒灭活处理和血液制品可传播甲型肝炎，因该法对非包膜病毒无效。而紫外线照射法能有效灭活非脂包膜病毒，我们将S/D法与紫外照射法进行有机结合，取得了十分满意的效果。

发明内容

本发明的目的是针对国内现有破伤风免疫血浆效价低、非脂包膜病毒难以完全除去等不足，提供一种效价高、安全性好的高效价抗破伤风免疫血浆。

实现本发明目的技术方案是：