[发明专利]复方甘草酸苷注射液杂质胱氨酸的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及复方甘草酸苷注射液杂质胱氨酸的检测方法，用于定性或定量测定胱氨酸。

背景技术

复方甘草酸苷注射液是由0.2％甘草酸苷、2％甘氨酸和0.1％盐酸半胱氨酸等组成的复方制剂。具有抗炎、免疫调节、抑制肝细胞损伤、促进肝细胞增殖以及抑制病毒增殖和灭活病毒等作用，临床上主要用于治疗慢性肝病，改善肝功能异常以及治疗湿疹、皮肤炎、荨麻疹。近20余年来因其具有抗炎作用，免疫调节作用，对实验性肝细胞损伤的抑制作用，抑制病毒增殖和对病毒的灭活作用，抗变态反应作用，类激素样作用等而广泛应用于多种肝病、皮肤病等疾病的治疗。

复方甘草酸苷注射液中主药成分之一的盐酸半胱氨酸具有还原性，易被氧化为胱氨酸。

盐酸半胱氨酸：化学名称为L-2-氨基-3-巯基丙酸盐酸盐一水合物，化学式见式I。

胱氨酸：化学名称为L-3，3′-二硫双(2-氨基丙酸)，分子式为C₆H₁₂N₂O₄S₂，化学式见式II。

式I    式II

目前暂无复方甘草酸苷注射液中杂质胱氨酸检测的报道。为了更快速、精确检测注射液中的杂质胱氨酸，发明人提供了一种新的检测复方甘草酸苷注射液中的胱氨酸及其含量测定的方法，以实现简便、快速、精确控制产品质量的目的。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种用于检测复方甘草酸苷注射液中的胱氨酸的方法，采用高效液相色谱检测，HPLC检测条件如下：

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相A：水-七氟丁酸-三氟乙酸(500∶0.8～1.2∶0.3～0.7)，水-七氟丁酸-三氟乙酸优选体积比为(500∶1.0∶0.5)；

流动相B：甲醇或乙腈；

洗脱条件分两种：

其一为采用流动相A与流动相B以体积比80-90∶10-20混合洗脱；

其二为采用梯度洗脱，条件如下：

优选梯度洗脱条件如下：

流速：0.8～1.2ml/min；流速优选1.0ml/min；

柱温：30～40℃；柱温优选35℃；

蒸发光散射检测器：漂移管温度为110～120℃；载气流速为2.0～3.0L/min；进一步优选漂移管温度为115℃；载气流速为2.5L/min；

理论板数按胱氨酸峰计算应不低于2000。

实验材料的处理：

(1)供试品溶液的制备：取复方甘草酸苷注射液适量，作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：精密称取胱氨酸对照品适量，加少许稀盐酸溶解，再加水溶解，按常规方法配制成适宜浓度的对照品溶液。

该检测方法的优点是：操作简便；测定结果准确可靠；专属性更强；主峰保留时间在10分钟左右，检测时间较短。本发明检测方法在检出主峰后如果仅采用流动相A+流动相B混合冲柱，要耗时近120min才能将基线冲平；而在检出主峰后先采用流动相B洗脱至甘草酸苷及其杂质全部被洗脱出来，然后再采用流动相A和流动相B混合冲柱至基线冲平，可将整个检测时间缩短至30min左右，大大降低了每次进针的时间间隔，提高了检测效率。

采用上述检测方法可对复方甘草酸苷注射液杂质胱氨酸进行定性定量测定，实现控制产品质量的目的。本发明杂质检测方法的有益效果是操作简便，检测迅速，测定结果准确可靠，专属性更强；为检测杂质、控制产品质量提供了一种全新的选择。

附图说明

图1胱氨酸线性图

具体实施方式

以下通过对本发明具体实施方式的描述说明但不限制本发明。

一、以下为本发明复方甘草酸苷注射液杂质胱氨酸检测方法及含量测定方法的检测条件筛选实验。

1、确定流动相

初定流动相：流动相A-流动相B；流动相A为水-七氟丁酸-三氟乙酸，流动相B为甲醇；

蒸发光散射检测器，漂移管温度115℃；载气流速2.50L/min；

柱温：40℃；

流速：1.0ml/min。

甘氨酸对照品溶液：精密称取甘氨酸对照品适量，加水溶解稀释至1mg/ml，摇匀，即得。

盐酸半胱氨酸对照品溶液：精密称取盐酸半胱氨酸对照品适量，加水溶解稀释至1mg/ml，摇匀，即得。