[发明专利]一种白藜芦醇的生物生产方法有效
| 申请号： | 201210036763.2 | 申请日： | 2012-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN102605006A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 赵广荣;王长松;姚元锋 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22;C12N15/53;C12N15/55;C12N15/52;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/15 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王秀奎 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 藜芦 生物 生产 方法 | ||
1.一种白藜芦醇的生物生产方法，其特征在于，按照下述步骤进行：
步骤1，首先设计并优化苯丙氨酸羟化酶基因、酪氨酸氨解酶基因、4-香豆酰辅酶A连接酶基因和白藜芦醇合酶的基因序列，并全合成这些目标基因；
步骤2，其次使用酶切连接的方法将获得的目标基因连接到表达载体上；
步骤3，然后将构建好的表达载体转化到菌株中，得到重组工程菌株；
步骤4，最后对重组菌株进行发酵，并从发酵产物中分离纯化白藜芦醇。
2.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的生物生产方法，其特征在于，
其中所述苯丙氨酸羟化酶基因优选斯氏假单胞杆菌的苯丙氨酸羟化酶基因序列，使用jcat对其进行密码子优化，序列如序列表SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列；
所述酪氨酸氨解酶基因优选黄孢原毛平革菌的酪氨酸氨解酶基因序列，使用jcat对其进行密码子优化，序列如序列表SEQ ID NO.4所述的核苷酸序列；
所述4-香豆酰辅酶A连接酶基因优选天蓝色链霉菌的4-香豆酰辅酶A连接酶基因序列，使用jcat对其进行密码子优化，序列如序列表SEQ ID NO.7所述的核苷酸序列；
所述白藜芦醇合酶基因优选虎杖的白藜芦醇合酶基因序列，使用jcat对其进行密码子优化，序列如序列表SEQ ID NO.10所述的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的生物生产方法，其特征在于，所述步骤3中的菌株为大肠杆菌BW25113或者谷氨酸棒状杆菌ATCC21673。
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