[发明专利]在大肠杆菌中高效表达可溶性斑马鱼肌酸激酶的方法

权利要求书

1.在大肠杆菌中高效表达可溶性斑马鱼肌酸激酶的方法，其特征是包括以下步骤：

1)、将导入ckmt2基因的大肠杆菌的菌液于24～26℃、异丙基硫代半乳糖苷浓度为0.15～0.25mM，转速150～250rpm的条件下进行诱导表达4～6小时；

所述菌液的OD600nm为0.4～0.6；

2)、诱导表达所得的产物经破碎处理后，再离心，所得的破碎后产物上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶融合蛋白。

2.根据权利要求1所述的在大肠杆菌中高效表达可溶性斑马鱼肌酸激酶的方法，其特征是：

所述步骤2)为：

诱导表达所得的产物先离心，弃上清；所得的菌体中加入PBS重悬后，再经破碎处理直至未见有白色菌体；将破碎后所得的产物离心，所得的破碎后产物上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶融合蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的在大肠杆菌中高效表达可溶性斑马鱼肌酸激酶的方法，其特征是：

所述步骤1)为：将导入ckmt2基因的大肠杆菌的菌液于25℃、异丙基硫代半乳糖苷浓度为0.2mM，转速200rpm的条件下进行诱导表达5小时。