[发明专利]一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法

权利要求书

1.一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)样品预处理：乳制品加酸水解，制得测试液；

(2)采用液相色谱-串联质谱联用分析L-羟脯氨酸含量：

液相条件：

采用亲水作用色谱柱HILIC，柱温：30℃，流速：0.8mL/min，进样量：20μL，

梯度洗脱：流动相为流动相A与流动相B的混合溶液，所述流动相A为10mM醋酸铵水溶液，pH＝5.6；所述流动相B为乙腈，

在0-10min内，流动相A的比例为15％，流动相B的比例为85％；在10-12min内，流动相A的比例由15％升至45％，流动相B的比例由85％降至55％；在12-18min内，流动相A的比例保持在45％，流动相B的比例保持在55％；在18-20min内，流动相A的比例由45％降至15％，流动相B的比例由55％升至85％；以上百分比均为体积百分比；

质谱条件：

采用电喷雾离子源，扫描方式为正离子扫描，检测方式为多反应检测，电喷雾电压5500V，离子源温度600℃，气帘气压力20Psi，雾化气压力50Psi，辅助气压力30Psi。

2.如权利要求1所述的一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法，其特征在于：

步骤(1)中，当乳制品为液态乳制品时，其样品预处理为：

称取2.0g液态乳制品，加10.6mol/L盐酸溶液6-9mL，真空封管，于110℃下水解12～16h，挥发干溶剂，加水溶解，用NaOH溶液调节至中性，加水定容，转入离心管，8000转/min离心5-10min，过0.22μm微孔滤膜，制得测试液。

3.如权利要求1所述的一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法，其特征在于：

步骤(1)中，当乳制品为半固体状乳制品时，其样品预处理为：

称取1.5g半固体状乳制品，加入1.0mL蒸馏水混匀，加10.6mol/L盐酸溶液6-9mL，真空封管，于110℃下水解12～16h，挥发干溶剂，加水溶解，用NaOH溶液调节至中性，加水定容，转入离心管中，8000转/min离心5-10min，过0.22μm微孔滤膜，制得测试液。

4.如权利要求1所述的一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法，其特征在于：

步骤(1)中，当乳制品为固体状乳制品时，其样品预处理为：

称取0.5g固体状乳制品，加入2.0mL蒸馏水复原，加10.6mol/L盐酸溶液6-9mL，真空封管，于110℃下水解12～16h，挥发干溶剂，加水溶解，用NaOH溶液调节至中性，加水定容，转入离心管中，8000转/min离心5-10min，过0.22μm微孔滤膜，制得测试液。

5.如权利要求1-4中任一项所述的一种乳制品中L-羟脯氨酸含量的检测方法，其特征在于：

步骤(2)中，通过定性离子132.1＞86.0碰撞能量22V、定性离子132.1＞68.2碰撞能量18V进行定性分析，定量离子132.1＞86.0进行定量计算。