[发明专利]一种白花丹参总酚酸提取物、制备方法及用途

权利要求书

1.一种白花丹参总酚酸提取物，以白花丹参的根为原料，通过溶剂提取、溶剂萃取、柱层析纯化制备而成，主要含有丹酚酸B、丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸E、丹酚酸L和紫草素，总酚酸的含量大于90％，其中丹酚酸B和丹酚酸A的质量总含量不低于65％，丹酚酸A和丹酚酸B的质量比为0.10～0.40∶1。

2.如权利要求1所述的白花丹参总酚酸提取物，其特征在于是按以下方法制备的：

以白花丹参的根为原料，粉碎后，以10wt％～90wt％甲醇、10wt％～90wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水为提取溶剂进行提取，所述溶剂量与原料的重量比为6～30∶1，重复提取2～3次，合并滤液；进行以下处理，得酸性滤液：

i.对于所述提取溶剂为浓度10～90wt％甲醇水溶液、10～90wt％乙醇提取得到的滤液，浓缩后，用有机溶剂萃取脱去脂溶性杂质，将水层以2.5N盐酸调pH＝3～5，滤过，得酸性滤液；或者，

ii.对于所述提取溶剂为水得到的提取液，以2.5N盐酸调pH＝3～5，滤过，得酸性滤液；或者，

iii.对于所述提取溶剂为pH＝3～5的酸水得到的提取液，直接过滤，得酸性滤液；

将所得酸性滤液直接进行大孔吸附柱层析，先以水洗脱，再分别以pH＝3～5的50wt％、70wt％酸性乙醇洗脱，收集50wt％、70wt％酸性乙醇洗脱液，以NaHCO₃水溶液调pH至中性，在50℃条件下减压浓缩至无乙醇，然后加水稀释，加水量为原料重量的2倍，以2.5N盐酸调pH＝3～5，滤过，将滤液直接加到C18反相硅胶柱的顶端，进行反相硅胶柱层析纯化，先以水洗脱，再以50wt％乙醇洗脱，收集50wt％乙醇洗脱液，在50℃条件下减压蒸干，即得白花丹参总酚酸提取物。

3.权利要求1所述的白花丹参总酚酸提取物制备方法，步骤如下：

(1)溶剂提取

原料白花丹参的根经过粉碎后，以10～90wt％甲醇水溶液、10～90wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水为提取溶剂进行提取，所用溶剂量与原料的重量比为6～30∶1，重复提取2～3次，除去药渣，合并滤液；

优选的，所述的提取溶剂是50～70wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水，最优选的为pH＝3～5的酸水；

(2)浓缩，脱脂

对于所述提取溶剂为10wt％～90wt％甲醇水溶液、10wt％～90wt％乙醇所得到的提取液，在50℃条件下减压浓缩至无乙醇，然后加水稀释，加水量为原料重量的4～6倍，再以等体积的有机溶剂萃取，重复萃取2次，弃去石油醚层，将萃取后的水层以2.5N盐酸调pH＝3～5，得酸水溶液；

所述萃取脱脂用的有机溶剂是石油醚、二氯甲烷或氯仿，优选的石油醚或二氯甲烷；

(3)大孔吸附树脂柱层析

a.步骤(1)中以pH＝3～5的酸水为提取溶剂时，得酸性滤液；

b.步骤(1)中以水为提取溶剂时，所得水提液以2.5N盐酸调pH＝3～5，得酸性滤液；

c.步骤(2)所得的酸水溶液，滤过，得酸性滤液；

将上述a、b或c中所述的酸性滤液直接加到大孔吸附树脂柱的顶端，使其缓慢流过大孔吸附树脂柱，然后以水洗脱6～8个保留体积，再分别以pH＝3～5的50wt％乙醇洗脱4～6个保留体积，pH＝3～5的70wt％乙醇洗脱6～8个保留体积，收集50wt％、70wt％酸性乙醇洗脱液，以10wt％NaHCO₃水溶液调pH至中性，在50℃条件下减压浓缩至无乙醇；

优选的，所述大孔吸附树脂为YWD06大孔吸附树脂；

(4)C18反相硅胶柱层析

将步骤(3)中浓缩后的洗脱液加水稀释，加水量为原料重量的2倍，以2.5N盐酸调pH＝3～5，过滤，将滤液加到C18反相硅胶柱的顶端，进行反相硅胶柱层析纯化，先以水洗脱6～8个保留体积，再以50wt％乙醇洗脱4～6个保留体积，在50℃条件下减压蒸干，即得白花丹参总酚酸提取物。

4.如权利要求3所述的白花丹参总酚酸提取物制备方法，其特征在于步骤(1)中所述的提取方法是用加热提取法、超声提取法、渗滤提取法或植物组织破碎提取法；其中优选的，加热提取法、超声提取法和植物组织破碎提取法中所用的提取溶剂用量为原料重量的6～10倍，渗滤提取法中所用的提取溶剂用量为原料重量的20～30倍。