[发明专利]一种草鱼基因组DNA快速提取方法

权利要求书

1.一种草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)裂解：草鱼鳍条组织经无菌水清洗后，吸干水分，剪成小碎块，置于无菌离心管中，加入裂解液，颠倒混匀，45-65℃下，裂解1-2.5小时至澄清得草鱼鳍条组织裂解液，裂解过程中将离心管来回颠倒数次；

2)离心：将草鱼鳍条组织裂解液在离心机上离心；

3)吸附：吸取草鱼鳍条组织裂解液离心后的上清液，加入用NaAc溶液滤洗过的吸附柱中，其下面附收集管，静置2-4min后将吸附柱离心，弃去收集管中的废液；

4)漂洗：向吸附柱中加入洗涤液后将吸附柱离心，弃去收集管中的废液；

5)溶解：将漂洗后的吸附柱放置在无菌离心管中，静置0.5-2min，加入无菌水，静置2-4min后离心，离心管中即为收集的DNA。

2.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤1)中裂解液由pH值为8.0，摩尔浓度为1M的Tris·HCl水溶液，pH值为8.0，摩尔浓度为0.5M的EDTANa₂水溶液，质量含量为10％的SDS水溶液，无菌水，蛋白酶K按体积比5∶20∶10∶64∶1混合而成。

3.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤1)中裂解液的其用量为：1mg鳍条组织加入20μl裂解液。

4.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤)中NaAc溶液为3M，冰醋酸调节pH值至5.2。

5.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤4)中洗涤液由pH值为7.4，摩尔浓度为1M的Tris·HCl水溶液，pH值为8.0，摩尔浓度为0.5M的EDTA水溶液，无水乙醇，无菌水按体积比4∶1∶350∶235混合而成。

6.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤4)中洗涤液的体积为步骤3)中加入到吸附柱中上清液体积的1-3倍。

7.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤5)中无菌水的体积为步骤3)中加入到吸附柱中上清液体积的0.5-1.2倍。

8.根据权利要求1所述的草鱼基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤2)-5)中，离心温度为4-8℃下，离心转速为3000-5000rpm，离心时间为1-5min。