[发明专利]一种枯草芽孢杆菌LSSE-22及其应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌LSSE-22(Bacillus subtilis)，其保藏编号为：CGMCC No.4970。

2.权利要求1所述枯草芽孢杆菌LSSE-22的应用。

3.一种纳豆食品，其特征在于，所述纳豆食品由豆类底物经权利要求1所述枯草芽孢杆菌发酵制得。

4.根据权利要求3所述的纳豆食品，其特征在于，所述豆类底物为鹰嘴豆或黄豆。

5.一种纳豆食品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将权利要求1所述枯草芽孢杆菌LSSE-22菌株接在LB液体培养基上37℃培养12h后放置于无菌管中，-70℃冷冻保藏；

2)制备种子液；

3)制备豆类发酵底物，其中所述豆类为鹰嘴豆或黄豆；

4)发酵培养：按照2％-5％(v/w)的接种量，将种子液加入豆类发酵底物中混匀，31-37℃静止培养36-48h，获得纳豆食品。

6.根据权利要求4所述的纳豆食品的制备方法，其特征在于，所述种子液制备方法包括以下步骤：

1)将冷冻保藏的菌种接种到LB固体培养基平板上，37℃培养12h，使其活化；

2)将活化的菌种转接到LB液体种子培养基中，37℃，180rpm培养8-14h，制得种子液。

7.根据权利要求4所述的纳豆食品的制备方法，其特征在于，所述豆类发酵底物制备方法包括以下步骤：

1)精选：去除变色、霉烂、虫蛀的豆子，除去其中杂物，并用水清洗；

2)浸泡：加入5倍体积(v/w)的水，室温浸泡12h；

3)沥水，使豆子的初始含水量为50％-70％；

4)蒸煮：将完整豆子或者经破碎处理的豆子在115℃高温高压蒸煮30min，制得豆类发酵底物。

8.一种纳豆激酶水提物冻干粉，其特征在于，经由权利要求2所述纳豆食品制备获得，富含纳豆激酶和总酚。

9.一种制备纳豆激酶水提物冻干粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：

向权利要求2所述纳豆食品中添加4倍体积(v/w)的水，200r/min搅拌1h，5000-10000g离心20-40min，除去固体物质，上清液冷冻干燥48h，获得水提物冻干粉。

10.一种同时制备纳豆激酶冻干粉和总酚冻干粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)水提：向权利要求2所述纳豆食品中添加4倍体积(v/w)的水，200r/min搅拌1h，5000-10000g离心20-40min，除去固体物质，获得水提物；

2)乙醇分离：向水提物中添加3倍体积的无水乙醇，室温静止沉淀1h，离心收集沉淀物，冷冻干燥，获得纳豆激酶干粉；同时，收集上清液，经过冷冻干燥，获得总酚冻干粉。