[发明专利]一种合成利西拉来的方法

权利要求书

1.一种合成利西拉来的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取Fmoc保护的氨基树脂与脱保护剂混合，脱保护后，获得氨基树脂；

步骤2：取侧链保护基团为Boc的Fmoc-Lys-OH与氨基树脂通过偶联剂进行缩合，获得侧链保护基团为Boc的Fmoc-Lys-氨基树脂；

步骤3：按照Fmoc固相合成法重复步骤1中脱保护与步骤2中氨基酸与树脂偶联的操作，将具有侧链保护基团的氨基酸从肽链碳端到氮端依次偶联，获得肽树脂；所述氨基酸的α-氨基的保护基团为Fmoc；

步骤4：取所述肽树脂经裂解液裂解，脱除保护基团，经乙醚沉降、离心、干燥后获得利西拉来粗品，再经纯化、转盐后，即得；

所述具有保护基团的氨基酸中，赖氨酸的侧链保护基团为Boc，丝氨酸的侧链保护基团为tBu，天冬酰胺的侧链保护基团为Trt，色氨酸的侧链保护基团为Boc，谷氨酸的侧链保护基团为OtBu，精氨酸的侧链保护基团为Pbf，谷氨酰胺的侧链保护基团为Trt，天冬氨酸的侧链保护基团为OtBu，苏氨酸的侧链保护基团为tBu，组氨酸的侧链保护基团为Trt。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述纯化为，取利西拉来粗品溶于水获得粗肽溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以pH值为6.5～7.0的磷酸盐缓冲溶液为A相，乙腈为B相，梯度按照B％：12％～32％，将粗肽溶液进行梯度洗脱。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述转盐为，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，以质量浓度0.1％～0.2％醋酸水溶液为A相；乙腈为B相，梯度按照B％：5％～35％，进行梯度洗脱。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脱保护剂为20％哌啶/二甲基甲酰胺溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述偶联剂为DIC、EDC、HONb、HOBt、HOAt、HATU、HBTU、TBTU、DIPEA、TMP、PYBOP或PYAOP中的一种或两者以上的混合物。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述裂解液为三氟乙酸、苯甲硫醚、1，2-乙二硫醇、苯甲醚和苯酚的混合溶液。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述裂解液中三氟乙酸、苯甲硫醚、1，2-乙二硫醇、苯甲醚和苯酚的体积比为90～95∶1～4∶1～2∶1～2∶1～2。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Fmoc保护的氨基树脂选自Rink Amide Resin，Rink Amide-BHA Resin，Rink Amide-MBHA Resin，Rink Amide-AM Resin，Sieber Resin，Sieber-AM Resin。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Fmoc保护的氨基树脂替代度为0.1～0.5mmol/g。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脱保护或所述缩合均经过Ninhydrin检测法检测。