[发明专利]一种燕麦镰孢菌及其菌剂和应用

说明书

技术领域

本发明属于农业微生物领域，具体涉及一种燕麦镰孢菌，以及利用该燕麦镰孢菌生产的微生物菌剂和应用。 

背景技术

野燕麦（Avena fatua L.）属于禾本科（Poaceae）、燕麦属（Avena），是一年生草本植物，又称铃铛麦。中国各省均有分布。该属有34种。株高30～150厘米。须根；茎丛生；叶鞘松弛，叶舌大而透明；圆锥花序；颖果纺锤形。野燕麦是小麦的伴生杂草，由于发生的环境条件一致，苗期形态相似，难以防除，危害极大。野燕麦的生长习性不仅与小麦相似，而且出苗不一致，长势凶猛，繁殖率高。成熟比小麦早。小麦因野燕麦危害后，株高降低；分孽数减少，穗粒数减少，千粒重降低，导致大幅度减产。在我国野燕麦发生严重的地区，小麦一般减产20～30%，重者达40～50%，更重者造成绝产。在小麦地，每平方米30～40株野燕麦的草害程度，每公顷造成300～600公斤损失，每平方米146株的严重草害情况下，导致损失高达每公顷90O斤。据报导，田间野燕麦穗数每亩0～127.8万个密度下，野燕麦穗数每增加1万穗，小麦产量损失2.7公斤。目前防除野燕麦的方法主要是采用耕作、栽培技术措施或使用化学药剂。但是由于野燕麦种子产生量大，种子在土壤中持续4～5年均能发芽，有的经过火烧和牲畜胃、肠后仍能发芽，使得现有技术措施的防除效果非常差。 

利用杂草的病原微生物研制专化性强、对目标杂草以外的植物影响小、环境负效应少、安全性高的生物除草剂，有可能成为防除杂草的有效途径。 

张宗俭（张宗俭等《中国生物防治》1996.12（4）：171-173）从自然罹病的野燕麦植株分离到一株燕麦叶枯菌，用该菌丝体接种整株幼苗或离体叶片试验表明，该菌只侵染野燕麦而不感染小麦，是一种潜在的防除野燕麦的真菌除草剂菌株。燕麦镰孢菌GD-2（朱海霞等.中国生物防治.2010.26（增刊）：84-89）对野燕麦的种子萌发具有显著的抑制作用，并造成野燕麦种子萌芽管损伤，温室接种试验表现对野燕麦较强的致病作用，表现叶片失水黄化、植株矮小，鲜重抑制率高，对油菜表现安全。“燕麦B”（程亮.作物杂志.2008.6：52-55）菌株在孢子浓度1×10⁷个/mL对野燕麦的发病率和病情指数分别为70%和40以上。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于野燕麦生物防治的燕麦镰孢菌菌株，该菌株可高效、长效抑制在小麦田的野燕麦，并且对环境友好。 

本发明的另一目的在于提供利用上述燕麦镰孢菌菌株生产的微生物菌剂及其制备方法。 

本发明第三个目的在于提供上述燕麦镰孢菌及其微生物菌剂在防治油菜田野燕麦上的应用。 

为实现上述目的，本发明的技术方案如下： 

一种燕麦镰孢菌（Fusarium.avenaceum）菌株GD-2，已于2011年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5579；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；分类命名：Fusarium  avenaceum。

利用上述燕麦镰孢菌GD-2生产的微生物菌剂，其活性成份为菌体和/或它的胞外代谢产物。 

上述微生物菌剂可以为液体制剂。 

上述微生物菌剂可以为可湿性粉剂。 

上述微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤： 

（1）菌种活化：将低温保存的菌株GD-2在PDA平板培养基上活化扩繁备用；

（2）种子液的制备：按常规方法制作PDB液体培养基，高压湿热灭菌后，接入步骤（1）活化的菌株GD-2，在24～28℃下振荡培养48～72h，得种子液；

（3）发酵培养：将以葡萄糖和尿素分别作为碳、氮源（C/N为6:1～5:1）。其它组份用量同查彼（Czapek）培养液，121℃高压湿热灭菌灭菌30分钟，待灭菌培养液冷却至室温时，将步骤（2）的种子液按按5～10%的比例接入发酵液，24～28℃振荡黑暗培养5～7天。

（4）检测发酵液中的分生孢子数量，待发酵液中分生孢子数量达到10⁸个/mL，停止发酵培养，得到菌株发酵液。 

（5）菌剂的制备：将液体发酵获得的菌液与吐温-80、水按1:0.005：1（V/V）混匀，即得液体制剂。 

GD-2可湿性粉剂的制备