[发明专利]樟树叶烟用香料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种烟用香料的制备方法，具体地指一种樟树叶烟用香料的制备方法。

背景技术

加香加料是卷烟工艺中的关键环节，是完善产品风格的决定性因素和提高卷烟香气质量的有效手段之一。目前烟用香料按香料生产方法的不同主要分为2种，即采用各种分离手段直接从烟草或其它植物中提取的天然香料和采用化学反应合成的香料。

樟树叶中含量丰富的樟叶黄酮和各种维生素，可以有效地防止烟草中尼古丁、苯并芘、放射性元素及大量的自由基等对人体的危害。樟叶中的多酚类物质(樟多酚)可与香烟中尼古丁化合形成无毒复合物，对烟碱还有良好的过滤作用。在烟丝中加入不同浓度的樟叶提取物，能降低卷烟焦油含量和焦油的致突变性。樟多酚对气相烟引起鼠肺细胞膜损伤具有抑制作用，可抑制气相烟自由基引起的膜脂类分子的过氧化作用，对维护细胞膜的流动性有良好效果，可以有效地清除由GPCS(香烟气雾)处理的大鼠肝线粒体产生的脂质自由基，能抑制烟气中有害物质的生物活性和它对生物体基因的恶变，对“亚硝胺”、“黄曲霉毒素B1”等其它强致癌物的毒性，也有抑制作用。

由于樟树叶具有上述的多项优点，现有技术已有将樟树叶精油用于烟草工业中报道，但是并未详述其工艺过程。

发明内容

本发明的目的在于填补现有技术的空白，提供一种樟树叶烟用香料的制备方法。

为实现上述目的，本发明所提供的樟树叶烟用香料的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(1)原料准备：

①选取樟树叶作为原料、灭菌得到无菌樟树叶备用；灭菌条件可选用在115℃下灭菌15～20min，为本领域常用技术手段；灭菌前可将樟树叶粉碎成樟树叶粉，使微生物分解樟树叶时更快速。

②烟叶复合培养基的制备：将烟叶和水按1∶5的比例混合后加热至100℃，并保持1～2小时，过滤得到烟水，将烟水和微生物固体培养基按3∶7～10的比例混合，制成烟叶复合培养基；制作烟叶复合培养基在于为其后的微生物培养提供适宜的生长环境，促进能分解烟草中有机物，产生香气的微生物有更大几率成为优势菌种。

(2)产香微生物的筛选：

①取烟叶5～10g，加入到无菌蒸馏水中，从中取100～1000μl的液体，滴加到由步骤(1)得到的烟叶复合培养基上，以平板划线分离或稀释涂平板法，在有氧或厌氧条件下培养，长出菌落后，将烟叶复合培养基放到体视镜下筛查，挑取10～50个酵母菌和/或芽孢杆菌的单菌落；发明人在大量的试验中得出酵母菌作为能产香微生物的效果更优秀，其次为芽孢杆菌，其他的菌体不适宜作为产香微生物的菌种培养。

②将挑出的单菌落在烟叶复合培养基中分别进行小量扩增培养，将小量扩增培养得到的菌液与无菌樟树叶混合，进行小试量的固体堆积发酵，然后对发酵好的樟树叶进行提取，获得发酵型樟树叶提取物；将得到的单菌落做小试培养，并提取其分泌的挥发油为筛选产香微生物做准备。

③将发酵型樟树叶提取物稀释后添加至香烟中，并通过卷烟加香评吸筛选所需的产香微生物，然后保存筛得的产香微生物的菌种；需要说明的是，卷烟加香评吸一般选取10～15人进行人工的香味评吸，综合评价能够产生增加酱香和柔和细腻烟气作用的微生物作为产香微生物，为本领域常用技术手段，此处不做赘述。保存筛选出的产香微生物菌种可以将其直接作为以后的发酵菌种，而不必每次进行微生物筛选工作，以简化工艺程序。

(3)利用步骤(2)中得到的产香微生物与无菌樟树叶混合，进行固体堆积发酵；

需要说明的是，如果是将保存的产香微生物菌种取出来进行樟树叶的发酵，则需要先将保存的菌种活化，其过程为：将所述产香微生物的菌种接种到斜面培养基上，置于20～37℃的恒温培养箱中培养24～48h使其中的菌种活化，再将活化的菌种接种于添加糖源的液体培养基中，于20～37℃恒温培养24～48h得到的培养液，将所述培养液离心弃除上清液，所得到的沉淀用生理盐水稀释震荡均匀，即得到的活化菌种液；斜面培养基优选为固体PDA培养基。添加糖源的液体培养基优选为PDA液体培养基，更适合酵母菌和芽孢杆菌的生长。

(4)对步骤(3)得到的发酵好的樟树叶进行提取，得到樟树叶烟用香料。

上述方法中，步骤(1)中所述的烟叶优选为自然陈化一年至两年的烟叶，其表面的产香微生物较其他的微生物多，为烟叶表面的优势菌种，使产香微生物的筛选更容易。

步骤(1)中所述的烟叶可选为白肋烟叶。