[发明专利]樟树叶烟用香料的制备方法

权利要求书

1.一种樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

(1)原料准备：

①选取樟树叶作为原料、灭菌得到无菌樟树叶备用；

②烟叶复合培养基的制备：将烟叶和水按1∶5的比例混合后加热至100℃，并保持1～2小时，过滤得到烟水，将烟水和微生物固体培养基按3∶7～10的比例混合，制成烟叶复合培养基；

(2)产香微生物的筛选：

①取烟叶5～10g，加入到无菌蒸馏水中，从中取100～1000μl的液体，滴加到由步骤(1)得到的烟叶复合培养基上，以平板划线分离或稀释涂平板法，在有氧或厌氧条件下培养，长出菌落后，将烟叶复合培养基放到体视镜下筛查，挑取10～50个酵母菌和/或芽孢杆菌的单菌落；

②将挑出的单菌落在烟叶复合培养基中分别进行小量扩增培养，将小量扩增培养得到的菌液与无菌樟树叶混合，进行小试量的固体堆积发酵，然后对发酵好的樟树叶进行提取，获得发酵型樟树叶提取物；

③将发酵型樟树叶提取物稀释后添加至香烟中，并通过卷烟加香评吸筛选所需的产香微生物，然后保存筛得的产香微生物的菌种；

(3)利用步骤(2)中得到的产香微生物与无菌樟树叶混合，进行固体堆积发酵；

(4)对步骤(3)得到的发酵好的樟树叶进行提取，得到樟树叶烟用香料。

2.根据权利要求1所述的樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的烟叶为自然陈化一年至两年的烟叶。

3.根据权利要求1所述的樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的烟叶为白肋烟叶。

4.根据权利要求1所述的樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：步骤(2)中和步骤(3)中所述的固体堆积发酵为：将产香微生物按照1∶1～10的质量比接种到无菌樟树叶中，放置于28～35℃的培养箱中发酵2～7天，得到发酵好的樟树叶。

5.根据权利要求1所述的樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：步骤(2)中和步骤(4)中对发酵好的樟树叶进行提取的方法为水蒸气蒸馏法。

6.根据权利要求7所述的樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：所述水蒸气蒸馏法为：将上述发酵好的樟树叶，置于水蒸气蒸馏装置中，按发酵固体与纯净水质量比1∶10～15的比例加入的纯净水，加热至100℃，直至发酵固体与水的混合物开始沸腾，连续加热2～10h，收集发酵型樟树叶挥发油，利用95％的乙醇溶液按与挥发油质量比例100～1000∶1稀释挥发油，得到樟树叶烟用香料。