[发明专利]一种用于鲍养殖的肠道益生菌粉及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鲍的养殖活菌制剂，尤其是涉及一种主要用于鲍养殖的肠道益生菌粉及其制备方法。

背景技术

我国鲍养殖始于20世纪70年代后期，目前已成为世界第一鲍鱼养殖大国，年产值达40多亿元，成为我国海水养殖产业的重要组成部分。然而，伴随着养殖业的快速发展，集约化程度的提高以及沿海水质的日益恶化，鲍暴发性病害日益增多，特别是2000年以来，以养成阶段的季节转换期暴发性死亡最为严重，在养鲍场密集的区域发病率高达90％以上，造成了惨重的经济损失。同时抗生素滥用造成生物的抗药性，并引发了一系列环境和社会问题，使一度蓬勃发展的鲍养殖业陷入低谷，已成为制约养殖业发展的重要因素之一。鲍肠道益生菌可以针对养殖鲍过程中常见的肠胃病、细菌滋扰、不明原因产生的死亡及零星死亡，替代因抗生素引起的应激反应，在促进鲍鱼生长，防治病害方面发挥重要作用。且由于益生菌具有无毒、无残留、不产生抗药性等特点，对促进鲍健康养殖具有重要意义。

益生菌是一类活菌制剂，通过与病原菌竞争化学物质和黏附位点，产生拈抗物质或提供宿主必要营养物质或酶，或调节并激活宿主免疫防御体系，或改善宿主肠道营养与菌群平衡从而对宿主产生有益的生理作用(Verschuere L et al，Microbiol Mol Biol Rev.2000，64：655-671)。目前，利用益生菌来调节动物肠道微生态平衡，恢复机体正常生理功能、防治病害、促进生长，已逐渐成为世界范围内的热潮。

1986年，Kozasa等(Microbial Aliment Nutr，1986，164：351-358)首次利用芽抱杆菌(Bacillus toyoi)处理日本鳗鲡降低了由于感染爱德华氏菌而引起的死亡后，益生菌在水产研究方面得到迅速发展。但纵观水产生物益生菌方面的研究报道，仍主要集中在鱼类、甲壳类和双壳类，而针对腹足类鲍的益生菌相对较少。

目前，针对鲍养殖的益生菌及其制备存在以下几个问题：

(1)多利用其它水生动物或水体中分离得到的益生菌应用于鲍养殖中，而微生物具有宿主特异性及环境易感性，因此缺乏针对性和稳定性而无法产生良好的效果。

(2)筛选范围有限，如集中在养殖环境，或直接应用已报道的海洋细菌等，使益生菌菌种较为单一，它们在完全替代抗生素的过程中抗菌抗病毒效果并不理想。

(3)由于宿主消化道酸性环境的灭活及消化酶的降解作用，大部分益生菌不能以活菌状态到达肠道，或在肠道粘膜上定植，发挥有效的益生作用。

(4)目前，水产生物养殖用的活菌制剂多为胶囊或液体或菌体干粉形式，应用方式多直接投喂，或与饲料混合进行投喂。但存在鲍鱼拒食、益生菌无法与饲料粘合不能进入宿主体内发挥作用、益生菌外流至水体，使微生物数量激增造成养殖环境污染等问题。

发明内容

本发明目的在于针对现有养殖鲍益生菌应用中存在的问题及不足，提供一种能够有效、直接进入鲍肠道并发挥益生作用的用于鲍养殖的肠道益生菌粉。

本发明的另一目的在于提供一种具有操作简单、效果稳定、针对性强、不污染养殖环境等优点的用于鲍养殖的肠道益生菌粉的制备方法。

所述用于鲍养殖的肠道益生菌粉按质量比的组成如下：益生菌干粉∶琼脂粉∶饲料为(0.1～1)∶(1～20)∶(5～150)。

所述饲料可选自鲍饲料，所述饲料可选自大统牌、金牌、洪峰牌等鲍用饲料。

所述用于鲍养殖的肠道益生菌粉的制备方法包括以下步骤：

1)分别将鲍肠道中分离的海洋细菌Phaeobacter sp.AP1220和芽孢杆菌Bacillus stratosphericus A3440，经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培养，使菌体浓度达到对数生长期0.5～1.0×10⁹cfu/ml；

2)将各菌种发酵液混合后离心，弃上清，菌体沉淀洗涤，离心，灭菌，得菌泥；

3)配制干粉保护剂；

4)将干粉保护剂和菌泥混合，进行成膜反应，然后，将混合物预冻，再冷冻干燥，制成具有包埋层的活性益生菌干粉；

5)将益生菌干粉、琼脂粉和饲料混合，制成用于鲍养殖的肠道益生菌粉。