[发明专利]可表达耐热β-半乳糖苷酶的重组菌及构建方法和应用有效
| 申请号： | 201210015508.X | 申请日： | 2012-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN102559571A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 刘斌;刘宗保;黄一帆;邓云金;赵超 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/56;C12N15/63;C12N9/38;C12R1/19 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 耐热 半乳糖 重组 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种可表达耐热β-半乳糖苷酶的重组菌，其分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli.）BL21-LA1，已于2011年7月27日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No. 5097。
2.一种如权利要求1所述的可表达耐热β-半乳糖苷酶的重组菌的构建方法，其特征在于包括以下步骤：用同样的限制性内切酶双酶切表达载体PGEX-4T-2和β-半乳糖苷酶基因后，将β-半乳糖苷酶基因克隆到表达载体PGEX-4T-2中，将其转化至大肠杆菌感受态细胞中，挑取阳性重组工程菌菌落，提取质粒，然后采用双酶切和测序的方法鉴定。
3.根据权利要求2所述的可表达耐热β-半乳糖苷酶的重组菌的构建方法，其特征在于：所述β-半乳糖苷酶基因来自嗜热厌氧菌群。
4.一种利用权利要求1所述的重组菌表达耐热β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于：以IPTG为诱导剂培养重组菌BL21-LA1产酶，每100ml发酵液培养菌体生长至OD 600达到0.8后，加入 IPTG， 使其终浓度达为1 m mol/L， 37℃振荡培养4-6 h，诱导重组蛋白获得表达。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于福建农林大学，未经福建农林大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210015508.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
