[发明专利]检测杀虫晶体蛋白Bt Cry1Ab/Ac的方法及其专用酶联免疫试剂盒

权利要求书

1.杂交瘤细胞株Bt2F9，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.5162。

2.抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体是由权利要求1所述的杂交瘤细胞株Bt2F9分泌产生的。

3.权利要求2所述的单克隆抗体在检测或辅助检测Bt Cry1Ab/Ac蛋白中的应用。

4.权利要求1所述的杂交瘤细胞株Bt2F9或权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测或辅助检测Bt Cry1Ab/Ac蛋白的试剂或试剂盒中的应用。

5.一种检测或辅助检测Bt Cry1Ab/Ac蛋白的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有独立包装的权利要求2所述的单克隆抗体。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有独立包装的抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的多克隆抗体和/或独立包装的Bt Cry1Ab/Ac蛋白标准品和/或独立包装的用于标记权利要求2所述单克隆抗体的标记酶；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的多克隆抗体是以Bt Cry1Ab/Ac蛋白为免疫原免疫脊椎动物得到的。

7.根据权利要求5或6所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有独立包装的包被缓冲液和/或独立包装的洗涤液和/或独立包装的底物缓冲液和/或独立包装的终止缓冲液和/或独立包装的封闭液；

所述包被缓冲液的溶剂为水，溶质为Na₂CO₃和NaHCO₃；溶质Na₂CO₃和NaHCO₃在所述包被缓冲液中的浓度分别为0.01M和0.04M；

所述洗涤液的溶剂为水，溶质为Na₂HPO₄、KH₂PO₄、NaCl和吐温-20；溶质Na₂HPO₄、KH₂PO₄和NaCl在所述洗涤液中的浓度分别为0.02M、0.0015M和0.14M，所述吐温-20在所述洗涤液中的体积百分含量为0.1％；

所述底物缓冲液的溶剂为水，溶质为柠檬酸三钠和Na₂HPO₄；溶质柠檬酸三钠和Na₂HPO₄在所述底物缓冲液中的浓度分别为0.01M和0.03M；

所述终止缓冲液为2M的硫酸水溶液；

所述封闭液的溶剂为水，溶质为Na₂HPO₄、KH₂PO₄、NaCl和脱脂牛奶；溶质Na₂HPO₄、KH₂PO₄和NaCl在所述封闭液中的浓度分别为0.02M、0.0015M和0.14M；所述脱脂牛奶在所述封闭液中的质量百分含量为3％；

所述标记酶为辣根过氧化物酶。

8.一种鉴别或辅助鉴别转Bt Cry1Ab/Ac基因植物的方法，包括如下步骤：用权利要求5-7中任一所述试剂盒对待测植物进行检测，以与所述待测植物同种的非转基因植物为对照，若所述待测植物的吸光值大于所述对照的3倍，则所述待测植物为或候选为转Bt Cry1Ab/Ac基因植物，若所述待测植物的吸光值小于或等于所述对照的3倍，则所述待测植物为或候选为非转Bt Cry1Ab/Ac基因植物。

9.权利要求5-7中任一所述试剂盒在定量检测Bt Cry1Ab/Ac蛋白含量中的应用。