[发明专利]含长双歧杆菌菌体裂解液的组合物冻干粉及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含长双歧杆菌菌体裂解液的组合物冻干粉及其制备方法与在化妆品中的应用。

背景技术

长双歧发酵物裂解液是含有长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)生产的必需成分和长双岐的代谢产物（活性蛋白质、多肽及细胞因子）、细胞质成分、细胞壁成分及多糖复合物。这些物质可以特异性的激活和支持皮肤自身的保护机制及修复机制，以对抗成熟前的皮肤老化。用于化妆品添加以促进肌肤抗紫外、修复和重建完美构造、抗衰老、保湿防护和解决敏感性和问题皮肤，它们对问题皮肤的作用主要包括：1）激活紫外照射后正常的DNA修复机制，修复皮肤突变 2）保护皮肤并保持皮肤生机和充满活力，保持皮肤水分，去皱，保持肌肤嫩滑3）中和紫外引起的光衰老，抗衰老 4）对抗紫外引起的免疫抑制，回复皮肤平衡5）特异性的激活和支持皮肤自身的保护机制及修复机制，以对抗成熟前的皮肤老化。

中国专利CN 101380288A、专利名称为“用于处理敏感皮肤的长双歧杆菌菌种裂解物的用途”和中国专利 CN 101380289A、专利名称为“长双歧杆菌菌种裂解物用于干燥处理的美容用途”详细阐述了双歧杆菌属种裂解物对于处理和/或预防敏感皮肤特别有效；对干性的表皮或角质物质具有美容治疗作用，在处理鱼鳞癣、银屑病、表皮角化病、局部皮炎和头皮的干燥头皮屑状态中特别有效。此外Guéniche A等人使用长双歧杆菌的提取液证明了在体外和临床这种无细菌繁殖裂解液用于肌肤可以改善易过敏肤质，该裂解液还可以明显抑制神经元辣椒碱诱导降钙素基因相关肽（CGRP）的释放。人体试用结果显示使用含双歧杆菌提取物乳膏的志愿者在试验结束后皮肤敏感度显著降低。此外，试验处理导致了皮肤对物理和化学侵害的抗性增强。

经研究发现，鸡胚精华液含有多种营养成分、抗感染成分和生物活性物质，尤其是含有的类胰岛素生长因子（IGFs）在抗衰老方面表现尤佳。

长双歧杆菌裂解液除了文献已报道的在抗过敏以及预防皮肤干燥方面具有功效外，未见有预防衰老皮肤方面功效的报道，也未见长双歧杆菌裂解液和鸡胚精华液组合使用，制备抗衰老和美白化妆品的报道。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗衰老和美白功效的含长双歧杆菌菌体裂解液的组合物冻干粉及其制备方法和应用。

本发明提供的含长双歧杆菌菌体裂解液的组合物冻干粉，由长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液的混合液，由冻干保护剂海藻糖保护后经冻干、粉碎而获得；其中，混合液的体积百分比为：长双歧杆菌裂解液40%～90%，鸡胚精华液10%～60%，两者总量为100%；冻干保护剂海藻糖加量按质量体积比（kg/L）海藻糖：混合液=1:1.0～6.0。优选为长双歧杆菌裂解液50%～70%，鸡胚精华液30%～50%；冻干保护剂海藻糖加量按质量体积比（kg/L）海藻糖：混合液=1:2.0～5.0。更优选为长双歧杆菌裂解液55%～65%，鸡胚精华液35%～45%；冻干保护剂海藻糖加量按质量体积比（kg/L）海藻糖：混合液=1:3.0～4.0。 

本发明提出的长双歧杆菌裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉的制备方法，其步骤如下：

（1）将长双歧杆菌冻干粉和磷酸缓冲液按质量体积比（kg/L）为1:3.0～1:8.0的比例混合溶解，得到长双歧杆菌溶液； 

（2）将步骤（1）中的溶液用超声波处理，破碎长双歧杆菌的细胞壁，超声程序为：超声2～6s，间隔2～6s，超声15～30个循环；按此程序重复超声2～6次；

（3）超声后以5000～8000 rpm的转速离心15～30min；得上清液即长双歧杆菌裂解液；

（4）将长双歧杆菌裂解液与鸡胚精华液混合均匀，按体积比计，长双歧杆菌裂解液40%～90%，鸡胚精华液10%～60%，两者总量为100%；向该混合液中加入冻干保护剂海藻糖，按质量体积比计，海藻糖：混合液=1:1.0～1:6.0；在-45～-85℃下冷冻干燥12～36h，得长双歧杆菌裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉。

步骤（1）中，所述的长双歧杆菌冻干粉和磷酸缓冲液质量体积比（kg/L）优选为 1:4.0～1:6.0。

步骤（2）中，所述的超声程序优选为：超声3～5s，间隔3～5s，超声15～25个循环。按照此程序重复超声3～5次。

步骤（3）中，所述的离心转速优选为5500～6500rpm，离心时间优选为15～20min。