[发明专利]含长双歧杆菌菌体裂解液的组合物冻干粉及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种含有长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉，其特征在于由长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液的混合液，由冻干保护剂海藻糖保护后经冻干、粉碎而获得；其中，混合液的体积百分比为：长双歧杆菌裂解液40%～90%，鸡胚精华液10%～60%，两者总量为100%；冻干保护剂海藻糖加量按质量体积比为海藻糖：混合液=1:1.0～6.0（kg/L） 。

2.一种如权利要求1所述的长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉的制备方法，其特征在于步骤如下：

（1）将长双歧杆菌冻干粉和磷酸缓冲液按质量体积比为1:3.0～1:8.0（kg/L）的比例混合溶解，得到长双歧杆菌溶液； 

（2）将步骤（1）中的溶液用超声波处理，破碎长双歧杆菌的细胞壁，超声程序为：超声2～6s，间隔2～6s，超声15～30个循环；按此程序重复超声2～6次；

（3）超声后以5000～8000 rpm的转速离心15～30min；得上清液即长双歧杆菌裂解液；

（4）将长双歧杆菌裂解液与鸡胚精华液混合均匀，按体积比计，长双歧杆菌裂解液40%～90%，鸡胚精华液10%～60%，两者总量为100%；向该混合液中加入冻干保护剂海藻糖，按质量体积比计，海藻糖：混合液=1:1.0～1:6.0；在-45～-85℃下冷冻干燥12～36h，得长双歧杆菌裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤（1）中，所述的长双歧杆菌冻干粉和磷酸缓冲液质量体积比为 1:4.0～1:6.0（kg/L）。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤（2）中，所述的超声程序为：超声3～5s，间隔3～5s，超声15～25个循环；按照此程序重复超声3～5次。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤（3）中，所述的离心转速为5500～6500rpm，离心时间为15～20min。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤（4）中，按体积比计，长双歧杆菌裂解液为50%～70%，鸡胚精华液为30%～50%；冻干保护剂海藻糖加量按质量体积比为海藻糖：混合液=1:2.0～5.0（kg/L）。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述鸡胚精华液提取自健康孵化8～16天的鸡胚 具体提取步骤为：

（1）取孵化8～16天的健康鸡胚蛋，敲壳取鸡胚；

（2）用食品粉碎机将鸡胚打成匀浆，加入pH为6.8～7.2，浓度为30～50 mM的磷酸缓冲液，按质量比，鸡胚：磷酸缓冲液=1:1～3，4～10℃条件下，将鸡胚和磷酸缓冲液充分搅拌浸取过夜；

（3）用医用纱布过滤步骤（2）中的鸡胚浸取液，将滤液以4000～6000 rpm的转速离心15～30min；

（4）将离心后的上清液，用截留分子量为10000～20000 Da的中空纤维膜超滤进行过滤，得滤出液，即鸡胚精华液。

8.如权利要求1所述的长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉在制备对皮肤具有抗衰老和美白功效的化妆品中的应用。

9.一种化妆品组合物，其特征在于含有权利要求1所述的长双歧杆菌菌体裂解液和鸡胚精华液组合物冻干粉，其中，所述组合物冻干粉含量为化妆品组合物总重量0.1%～5%。

10.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其特征在于组合物是膏、霜、露、水、凝胶、洗剂或洗脱型产品。

11.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其特征在于该组合物还加入有化妆品用油性原料，所述油性原料包括硬脂酸酯类，油酸酯类，亚油酸酯类，棕榈酸酯类，异硬脂酸酯类，羟基硬脂酸酯类，肉豆蔻酸酯类，例如肉豆蔻酸异硬脂基酯、肉豆蔻酸丁酯；异棕榈酸酯类，月桂酸酯类，辛酸、壬酸、癸酸酯类，聚甘油酯类，羊毛脂衍生物类，季戊四醇酯类，蓖麻油酸酯类，柠檬酸，琥珀酸酯类，磷酸酯类，以及山嵛酸甘油基酯、没食子酸辛酯；还有脂肪酸类，脂肪醇类，芳香醇类，蜡类；油性原料的添加量为组合物总重量的0.01%～45%。