[发明专利]一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法有效

专利信息
申请号: 201210007674.5 申请日: 2012-01-11
公开(公告)号: CN102534048A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 孙肖红;郭金金;燕清丽;方艳辉;杨鹏飞 申请(专利权)人: 中国检验检疫科学研究院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
代理公司: 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 代理人: 尹振启
地址: 100123 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 taqman 探针 实时 荧光 rt pcr 检测 病毒 诊断 方法
【权利要求书】:

1.一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法,其特征在于,该非诊断性方法包括:

设计了一对引物和探针对待检样本进行实时定量检测,引物和探针序列为:

2.如权利要求1所述的非诊断性方法,其特征在于,所述探针连接的荧光基团为:FAM-BHQl,荧光探针5’端标记的荧光报告基团是FAM,3’端标记的非荧光淬灭基团为BHQl。

3.如权利要求1所述的非诊断性方法,其特征在于,所述该非诊断性方法包括步骤:

1)样本用裂解液和RNA抽提液处理,提取病毒RNA;

2)实时荧光RT-PCR反应,配制一定组分浓度的25μLPCR反应体系,混匀后短暂离心分装到PCR管中;

3)将待测样品加入到反应体系中,进行扩增;

4)收集荧光信号,检测Ct值。

4.如权利要求3所述的非诊断性方法,其特征在于,所述实时荧光RT-PCR反应的体系组分及其体积如下:

扩增条件:采用本领域的标准扩增条件。

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