[发明专利]用于流体中微粒子的多参数测量的设备和方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于表征微粒子，特别是生物细胞的电光流测量设备的一般领域，该设备包括要表征的流体的流在其中循环并包含要表征的细胞的测量室。这一领域基于使用电气和光学测量来计数并区分包含在要分析的样本中的细胞的分析方法。本发明更具体地涉及用于细胞计数和表征的多参数电光设备。

要表征的流体优选是血液样本，但其也可以是诸如脑脊髓液、骨髓等的另一类生物流体。样本还可以包含要区分和计数的任何类型的粒子。

更具体地，本发明涉及设备，其包括至少两个光源、电阻率测量设备和允许光学参数的测量，通常是消光测量和侧向散射测量的几个检测器。

这些测量实现了包含在流体中的生物细胞的表征。

背景技术

关于造血细胞，本领域技术人员知晓由容量分析或衍射测量获得的、包括消光和吸收现象的细胞的形态分析允许分辨包括红血球或红细胞、凝血细胞或血小板的主要细胞系与白血球或白细胞。后一个群体自身细分为几个类别，例如淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜曙红细胞和嗜碱粒细胞。

在某种程度上，可以通过同时确定这些细胞在白光中的体积和表观吸收来评价这些细胞的成熟度，例如在申请人提交的专利US5,138,181中所描述的。例如在公布文本WO2006/053960中描述了为近单色光开发的设备的实施例。

细胞成熟的这一评价是重要的，因为其允许进行早期诊断。通常，在没有任何病理的情况下，存在于循环血液中的大部分细胞是成熟的细胞。

对于每一个前述细胞类型，不同成熟度是已知的。例如，首先以原成红细胞形式构成红细胞，其也称为红血球或红血细胞，随后是嗜碱性成红血细胞形式，随后是多染性成红细胞形式。多染性成红细胞发育为嗜酸性成红血细胞，随后发育为网状细胞。一旦网状细胞进入循环血液中，就将这些网状细胞最终区分为红血球。

以成髓细胞的第一形式从骨髓得到白细胞或白血球。这些成髓细胞随后产生未成熟粒细胞，其稍后将变为嗜碱、嗜曙红或中性粒性白细胞，首先是未分裂的，但随后随着它们成熟，它们的核日益分裂。

这些相同的成髓细胞还是单核细胞系的起源，其产生成单核细胞、前单核细胞，及随后将进入外周血液中的单核细胞。

成髓细胞所源自的多能干细胞还产生借助淋巴干细胞的形式加以区分的淋巴细胞系，其中的部分细胞系，T-淋巴细胞系将继续其在胸腺和腺体中的成熟，另一部分将保留在骨髓中以给出B-淋巴细胞系。这些B-淋巴细胞一旦以浆细胞的形式激活，就产生抗体以抗击致病抗原。

血小板或凝血细胞得自于成巨核细胞，其源自髓样前体细胞，成髓细胞源于髓样前体细胞，一旦它们达到其最终成熟阶段，即凝血细胞基因巨核细胞（thrombocytogenic megakaryocytes），它们就借助其细胞质的分裂产生血小板。年轻的血小板，网织血小板，具有RNA分量，它是其原始细胞的剩余物。

某些病理的诊断需要循环血液中造血细胞的更为精细调整的计数和表征。尤其重要的是能够发现特定的群体，例如网状细胞和成红细胞，它们是红血球（红细胞）的未成熟形式。类似地，未成熟细胞、白细胞的前体（称为未成熟的淋巴细胞、单核细胞或粒性白细胞）的发现变得日益重要。活化的淋巴细胞或网织血小板的分类和计数也使得在患者诊断中获得真正的改进成为可能。

发明内容

本发明涉及分析设备及相关方法的开发，其通过提出了一种用于微粒子的表征的流式测量电光设备而实现对包含在样本中的每一个特定群体的改进的区分以及从而更好地计数，所述流式测量电光设备包括要表征的流体的流在其中循环的测量室、不相交光谱的至少两个光源、用于测量电阻率的设备以及均允许光学参数的测量的至少三个其他检测器，所述光学参数选自荧光、消光、广角衍射（侧向散射）、以及小角衍射（前向散射），所述电光设备的特征在于：

-第一光源，最小相干并具有最长波长，限定出与粒子的所述流垂直的主光轴，所述主光轴具有位于所述室的任一侧的两个光学组件，一个光学组件是使由所述第一光源发射的束成形的发射枪，另一光学组件是收集由所述第一光源发射的信号且位于所述测量室之后的接收枪；

-第二光源，最大相干并具有最短波长，限定出与所述主光轴相交并且垂直于粒子的所述流的副光轴；

-第一检测器，面对所述第一光源布置在所述接收枪的末端，并因此具有光场操作；

-所述接收枪包括收集光学装置，收集由所述第一光源与所述流中的粒子之间的相互作用而朝向所述第一检测器发出的束，这些收集光学装置使得在其部分路径上，所传送的光束基本上是准直束；