[发明专利]用于诊断组织损害的新抗体

说明书

相关申请

本申请要求于2010年11月29日提交的美国临时申请号61/417,682的优先权，其通过引用的方式整体并入本文。

技术领域

本发明涉及在受试者中在诊断或鉴定组织损害的组合物和方法，更具体地，本发明涉及在受试者中在诊断或鉴定补体介导的组织损害的组合物和方法。

背景技术

当补体激活完成终端途径以产生膜攻击复合体(MAC，C5b-9)时，会发生补体介导的组织损害。已知这些复合体导致组织损害。在一些疾病的指征，包括黄斑变性、类风湿性关节炎、心肌梗塞、和器官的再灌注损害中，补体起着重要的病理作用。使用非侵入性技术难以确定部位、强度和组织损伤的程度。在人类受试者中，一般是很难使用其他的非侵入性技术，以确定内部组织损伤，包括眼睛的损害。然而，可以应用诊断程序，如在本申请中提出的那些，以显示该信息。

发明概述

本申请涉及新抗体(neoantibody)或其片段，以及新抗体或其片段用于在受试者中以非侵入性或最小侵入方式诊断或鉴别组织损害。在某些实施方案中，所述新抗体或其片段可以用来鉴别和/或诊断疾病，如黄斑变性，中老年人中常见的眼科疾病。预期由新抗体或其片段明确确定该补体介导的病理学部位。通过沉积的C5b-9和作为补体激活的结果而在蛋白质上形成的其他新抗原表位(neoepitope)来测定病理学部位。

在一些实施方案中，所述疾病可以是年龄相关的黄斑变性(AMD)，并且玻璃膜疣可以是眼部组织中的病理位点。玻璃膜疣为黄色或白色的细胞外沉积，位于RPE和Bruch膜之间的黄斑区内，围绕视盘或外围。有两类玻璃膜疣；那些病理的和其他无病理的。本发明描述的新抗体或其片段通过检测与病理玻璃膜疣相关的补体蛋白质活化产物，能检测病理玻璃膜疣的存在。

根据本申请的新抗体或其片段能靶向独特的抗原表位，称为“新抗原表位(neoepitope)”，其在补体活化过程中形成，并且在补体活化之前不存在于补体蛋白质上。新抗原表位可以包括独特的抗原表位(其在补体片段上形成，作为补体蛋白质的裂解结果，并且其在母体补体(parent complement)蛋白质上不存在)、以及独特的抗原表位(其在补体活化产物中形成，作为补体蛋白质或片段在补体活化中复合或聚集的结果，并且在补体活化之前不存在于补体蛋白质上)。

例如，在补体激活中，C3被转换成C3a和C3b。可以通过抗-C3抗体检测到C3a和C3b，检测C3a和C3b的共同抗原表位。C3a和C3b还包括新抗原表位，其作为C3裂解的结果出现并且不存在于母体C3分子中。补体活化产物的新抗原表位的检测可以用于在受试者中补体-介导的组织损伤的检测。相似地，C5a和C5b含有作为C5裂解结果形成的新抗原表位。靶向针对C5a和C5b的新抗体及其片段不与C5蛋白质交叉反应，即使两者都来自C5。B因子通过D因子裂解成Ba和Bb，在本发明中，可以使用Ba和Bb的新抗体。虽然结合Ba和Bb的抗体还将结合B因子，新抗-Ba和新抗-Bb将不会结合B因子。针对Ba和Bb的新抗体或其片段可以用于补体介导组织损伤的检测。尽管结合Ba和Bb的抗体会与因子B结合，但是新抗-Ba(neo anti-Ba)和新抗-Bb(neo anti-Bb)不会结合因子B。

同样地，对C5b-9具有特异性的新抗体或其片段也是这样，被称为MAC复合体。MAC复合体由蛋白C5、C6、C7、C8和C9组成。C6，C7和C8的抗体将检测C5b-9的存在。在血液中或MAC复合体中发现的它们各自的游离蛋白质之间，这种抗体不会区分。能特异性地检测MAC复合体C5b-9的新抗体或其片段可以包括抗-聚合体C9或抗-C5b-9。非新抗体(Non-neoantibody)也会识别和检测这些蛋白质。然而，只有新抗-聚合体C9和新抗-C5b-9能在受试者中，在MAC复合体C5b-9和它的组成补体蛋白质之间区别。这些新抗体或其片段将无法识别组成MAC的组成蛋白质的可溶性形式。

可以使用各种抗-补体抗体来分析采自患者的血液样品是否存在补体蛋白。然而，不论组织是否损伤，可溶性补体蛋白基本上存在于血液中。补体激活后形成的新抗原表位非特异的抗体，将检测这些蛋白质和可溶性形式，并且检测病理将不可靠。在本发明中描述的新抗体或其片段能用来获得补体介导的组织损伤的特定属性。