[发明专利]人制瘤素M抗体及使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及能够中和与人细胞上的膜受体结合的制瘤素M产生的生物活性的人抗体和用途。

背景技术

制瘤素M(OSM)是由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和激活的T-淋巴细胞分泌的IL-6家族细胞因子的28kDa多功能成员(Tanaka&Miyajima，Rev Physiol Biochem Pharmacol(《生理学、生物化学和药理学综述》)149：39-53，2003)。分泌的OSM的羧基末端附近的蛋白水解裂解产生完全活性形式的OSM，其长度为209个氨基酸，具有两个N-连接的糖基化位点。OSM属于IL-6家族细胞因子，IL-6家族细胞因子包括(IL-6、IL-11、白血病抑制因子(LIF)、心肌营养素-1、睫状神经营养因子(CNTF)和心肌营养素样细胞因子(CLC))，它们共享共同受体亚基gp130蛋白质。在人体中，OSM通过由gp130和LIFRα亚基或gp130和OSMRβ亚基组成的受体异源二聚体传递信号。与其他IL-6家族的其他细胞因子相比，OSM在不存在任何附加膜结合辅助受体的情况下直接结合gp130(Gearing等人，Science(《科学》)255：1434-1437，1992)。在OSM结合到gp130之后，OSMRβ或LIFRα被募集从而形成高亲和力的信号传导复合物(Mosley等人，J Biol Chem(《生物化学杂志》)271：32635-32643，1996)。任一受体的激活导致通过JAK/STAT通路的信号传导(Auguste等人，JBiol Chem(《生物化学杂志》)272：15760-15764，1997)。

OSM主要由免疫系统来源的细胞产生，并且由于其信号传导受体分布广泛，其已与多种生物活性相关，包括细胞生长调节、神经发育和细胞外基质组成的调节。

如其名称所暗示，制瘤素M与致癌过程相关。然而，OSM也参与炎症中早期事件和导致有害病症例如肺纤维化的肥厚性通路。因此，需要提供能够阻断受体信号传导(gp130信号传导)事件的对人OSM特异的人抗体，该信号阻断抗体可对gp130表达细胞施加临床可用的毒害细胞、抑制细胞或免疫调节效果。

发明内容

本发明提供能够阻断与一种或多种生物活性相关的活性的OSM结合单克隆抗体，所述生物活性与宿主受试者的细胞、组织或器官上的OSM与OSM结合受体相互作用相关。提供了示例性OSM结合单克隆抗体的氨基酸序列，其可由用于在宿主细胞中表达的核酸编码。本发明的一种或多种OSM单克隆抗体限定OSM表面上的表位，当OSM被本发明的抗体紧密结合时，其被阻止与信号传导复合物的受体组分即gp130和LIFRα或gp130和OSMRβ相互作用，从而阻止配体连接驱动的信号传导和下游生物活性。

本发明的一个方面是与人OSM蛋白反应的分离的抗体，所述抗体具有如下所述单克隆抗体的抗原结合能力，该单克隆抗体包含具有如SEQ ID NO：13-18单独示出的氨基酸序列或在如SEQ ID NO：1-3示出的FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3的指定位置处的抗原结合域，如SEQ ID NO：27-29和47表示的CDR3；或包含具有如SEQ ID NO：23-26单独示出的氨基酸序列或在如SEQ ID NO：5-8及其变体示出的指定位置处的抗原结合域和如SEQ ID NO：19-22表示的CDR3。在一个具体实施例中，人OSM结合抗体包含选自SEQ ID NO：49-55的可变域。

在本发明的另一个实施例中，用作全长IgG结构的单克隆抗体结合域具有衍生自人IgG恒定域或其特定变体的恒定域，并且用作药物制剂中的治疗分子以阻止OSM与展示OSM受体组分的细胞结合。在另一个实施例中，结合域被构造为抗体片段，该抗体片段用作能够阻止OSM与展示OSM受体组分的细胞结合的治疗分子。在本发明的一个方面，提供了治疗制瘤素M相关的病症的药学上可接受的制剂、递送体系、或试剂盒或方法，其包含本发明的一个或多个OSM结合域，诸如但不限于如SEQ ID NO：29和47提供的13-28和30-46及变体。

附图说明