[发明专利]诊断Avellino角膜营养不良的系统

说明书

技术领域

本发明涉及诊断Avellino角膜营养不良的系统，更特别地涉及一个诊断Avellino角膜营养不良的系统，其中根据输入的第一PCR扩增值和第二PCR扩增值的比例确定样品是否正常或Avellino角膜营养不良。

背景技术

角膜营养不良是常染色体显性遗传病，开始时在角膜中央混浊，逐渐传开，并最终随着患者年龄增长而丧失视力。这一疾病包括Avellino角膜营养不良，颗粒状角膜营养不良，I型点阵角膜营养不良，Reis-圆盾角膜营养不良等等，均是编码βIG-H3蛋白质的基因突变引起的。

患有Avellino角膜营养不良的杂合患者随着年龄的增长表现出严重的视力丧失，并且杂合患者从6岁开始表现出完全丧失视力。Avellino角膜营养不良是1988年新命名的疾病，是由于发现具有遗传特性而从通常称为颗粒角膜营养不良的病中分出来的。同时该疾病已知在世界范围中是最常见的角膜营养不良，根据遗传分析，在韩国流行率是1/340到1/1000（杂合体病例），表明这是一种常见的营养不良疾病(Holland,E.J.等人，Ophthalmology，99：1564，1992；Kennedy,S.M.等人，Br.J.Ophthalmol.,80:489,1996;Dolmetsch,A.M.等人，Can.J.Ophthalmol.,31:29,1996;Afshari,N.A.等人，Arch.Ophthalmol.,119:16,2001;Stewart,H.S.Hum.Mutat.,14:126,1999)。

本发明人已经发现，如果杂合Avellino角膜营养不良患者进行LASIK外科手术，约2年后，角膜的混浊度开始逐渐增加并且最终导致视力丧失(Jun,RM等人，Ophthalmolgy,111:463,2004)。过去，进行眼外科手术的期望是LASIK或Excimer激光外科将能消除患有角膜营养不良的患者的视力模糊。并且，即便在韩国也已经进行了约300,000例LASIK外科手术，根据患有Avellino角膜营养不良的杂合患者的最小估计值1/1000计算，这将导致300人丧失视力。已经进行LASIK外科手术的患者多处在具有劳动力的20多岁和30多岁；所以，他们丧失视力导致严重的社会和经济问题。另外，自LASIK外科手术2000年在美国批准后，已经在非裔美籍人中发现进行LASIK外科手术的Avellino角膜营养不良患者丧失视力，这意味着在世界范围内可能存大量类似病例。

但是，尽管为了防止LASIK外科手术引起的Avellino角膜营养不良恶化需要准确地诊断Avellino角膜营养不良，但Avellino角膜营养不良的诊断仅仅通过显微镜观察角膜浊度来进行，从而使医生会错过患者的潜伏症状而对其进行LASIK外科手术，进而引起视力丧失。所以，非常需要快速而准确地诊断角膜营养不良。

另外，在常规诊断中，诊断结果可能会随例如医生的技术和患者的病况而变化。所以，需要开发出可靠性和准确度都有所提高的诊断方法。

因此，为了提供诊断包括Avellino角膜营养不良在内的要求在强化视力的外科手术之前能够准确诊断的角膜营养不良的新系统，本发明人进行了大量努力。结果，本发明人发现，当将第一PCR扩增值与第二PCR扩增值进行比较，如果第一PCR扩增值是第二PCR扩增值的5-9倍，样品DNA是正常的，如果第一PCR扩增值与第二PCR扩增值的比例为1：1.5至1.5:1，则样品DNA是Avellino角膜营养不良杂合体，如果第二PCR扩增值是第一PCR扩增值的5-9倍，则样品DNA是Avellino角膜营养不良纯合体，其中第一PCR扩增值是通过向样品DNA中加入能够扩增转化生长因子b-诱导(TGFBI)基因的外显子4的引物对和能够检测外显子4不含突变的TGFBI基因的探针而测定的，所述第二PCR扩增值是通过向样品DNA中加入能够扩增TGFBI基因的外显子4的引物对和能够检测外显子4含突变的TGFBI基因的探针而测定的。基于这样的发现，完成了本发明。

发明内容

技术问题

本发明的一个目的是提供诊断Avellino角膜营养不良的新系统，该系统能够以更简单和准确的方式不受医生技术影响地诊断Avellino角膜营养不良。

技术方案

为了实现以上目的，本发明提供了诊断Avellino角膜营养不良的系统，该系统包括：