[发明专利]用于治疗HIV的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及能够特异性结合于趋化因子受体（CXCR）的新抗体，特别是嵌合的和人源化的鼠单克隆抗体，以及编码此抗体的氨基酸和核酸序列。从一方面讲，本发明涉及能够特异性结合于CXCR4并具有对抗人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的强活性的新抗体、功能性片段或衍生物。本发明还包括这种抗体、功能性片段或衍生物作为预防和/或治疗性治疗HIV感染的药物的用途。

背景技术

趋化因子是小的、分泌肽，其控制着（特别是免疫反应期间）白细胞沿配体化学梯度（被称为趋化因子梯度）的迁移（Zlotnick A.等人，2000）。基于其NH₂-端半胱氨酸残基的位置、及与G蛋白偶联受体（其两个主要亚家族被命名为CCR和CXCR）的结合，将趋化因子分为两个主要的亚家族，CC和CXC。到目前为止，发现了超过50个人趋化因子和18个趋化因子受体。

趋化因子受体家族的若干成员作为主要受体CD4的共受体发挥作用，使得HIV1型的不同株能够进入细胞，主要的共受体是CCR5和CXCR4。T细胞向性X4HIV-1使用CD4和CXCR4进入细胞，而巨噬细胞向性R5HIV-1使用CD4和CCR5。双向性株能使用CXCR4和CCR5作为共受体。其它趋化因子受体中的CCR3、CCR2、CCR8、CXCR6、CXCR7、CX3CR1能作为HIV株更限制亚群的共受体发挥作用。

SDF-1（CXCR4的天然配体）以及CCR5的CCL3、CCL4、CCL4-L1和CCL5配体能够抑制HIV-1不同株引起的细胞融合和感染。这些发现促进了靶向趋化因子受体的抗HIV治疗的发展，导致CCR5小分子拮抗剂马拉维诺（maraviroc）获准与其它抗HIV-1试剂组合用于CCR5向性HIV-1感染的患者。然而，马拉维诺不能用于被双向性HIV-1感染的患者或者被CXCR4向性HIV-1感染的患者（VIDAL2009）。因此，对于通过鉴定能抑制X4向性HIV复制的CXCR4拮抗剂在X4向性和双向性HIV感染的患者中扩展此类治疗有明确的医学需求。

趋化因子受体4（也被称为融合素、CD184、LESTR或HUMSTR）以包括352个或360个氨基酸的两种同种型形式存在。残基Asn11是糖基化的，残基Tyr21被加入硫酸盐基团所修饰，而Cys109和186在受体的细胞外部分以二硫键桥相结合（Juarez J.等人，2004）。

不同类型正常组织、初始、非记忆性T细胞、调节性T细胞、B细胞、中性粒细胞、内皮细胞、原代单核细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、CD34+造血干细胞均表达此受体，而且在心脏、结肠、肝、肾和脑中以低水平表达。CXCR4在白细胞运输、B细胞淋巴细胞生成和髓细胞生成中起关键作用。

到目前为止所描述的CXCR4受体的唯一配体是间质细胞衍生因子1（SDF-1）或CXCL12。SDF-1在淋巴结、骨髓、肝、肺中大量分泌，而肾、脑和皮肤分泌程度较少。CXCR4还被拮抗性趋化因子，人单纯疱疹病毒III型所编码的病毒巨噬细胞炎症蛋白II（vMIP-II），所识别。

如前面所提及的，CXCR4受体是T细胞向性HIV-1分离株（X4病毒）的主要共受体。干扰此受体将以很有效的方式抑制X4病毒复制。

发明内容

本发明的一个发明性方面是生成抑制HIV复制的小鼠单克隆抗体（Mab）。本发明包括能结合于CXCR4同源二聚体并具有抗HIV感染的强活性的CXCR4Mab515H7（或其片段）。发明还包括能结合于CXCR4同源二聚体并具有抗HIV感染的强活性的CXCR4Mab301aE5（或其片段）。

令人吃惊的是，发明人已设法生成单克隆抗体，该抗体能够结合于CXCR4，并且能够诱导CXCR4同源二聚体的构象变化，而且能抑制原代分离株X4-HIV-1在PBMC中的复制。更特别的是，本发明的抗体还能够抑制原代分离株X4/R5-HIV-1在PBMC中的复制。

优选地，CXCR4化合物是选自如下的两个人CXCR4同种型之一：

-趋化因子（C-X-C基序）受体4同种型b[人（Homo sapiens）]，具有Genbank登录号NP_003458所描述的序列SEQ ID No.27：