[发明专利]酪氨酸-磷酸化的WBP2，一种新的癌症靶和生物标记物

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2010年8月30日提交的新加坡专利申请第201006302-2号的权益，其全部内容援引加入本文。

技术领域

本发明一般涉及确定癌症的倾向或者诊断和/或治疗癌症的方法和试剂盒。

背景技术

本发明的背景的以下讨论是为了促进本发明的理解。但是，应当理解该讨论不是承认或允许所提及的任何材料在本申请的优先权日期是公开的、已知的或任何管辖范围中常见的一般知识的部分。

通过核激素受体增强基因转录包括其通过蛋白-蛋白相互作用与共激活蛋白和基础转录复合物相互作用(1,2)。共激活蛋白可以作为转录接头发挥作用，或者通过组氨酸乙酰转移酶(HAT)或核小体重塑复合物修饰染色质。此外，共激活蛋白调节mRNA转运、翻译以及合成蛋白的翻译后修饰。一些已知的核激素受体共激活蛋白包括共激活蛋白的p160家族成员、SRC-1、SRC-2[TIF-2/GRIP-l/NCoA-2]、SRC-3[pCIP/ACTR/AIB-l/RAC-3/TRAM-1]、NRIF-3、E6-AP和WBP2。由于它们的多效作用，转录共激活蛋白作为在癌症发展中越来越多涉及的一组蛋白出现并不令人惊讶(3-5)。

转录共激活蛋白常进行翻译后修饰，例如磷酸化。SRC/pl60家族蛋白的特定成员的磷酸化可以增加它们的核定位(6)，抑制它们与非核受体激活蛋白的相互作用(7)或者刺激它们内在的共激活蛋白活性(8)。AIB1和PGC-1的磷酸化调节它们的半衰期和活性(9,10)。此外，通过Pak1磷酸化NRIF3会通过增加的ERa-NRIF3相互作用促进ERa反式激活(5)。

WW-结构域结合蛋白(WBP2)为转录共激活蛋白，据证实其通过激素依赖性ERα/PR-WBP2相互作用选择性和特异性地增强ERa和PR反式激活并将WBP2募集至激素应答元件(11)。WBP2包含内在的激活结构域。其3个聚脯氨酸(PPXY)基序之一-PY3对于其在ERα/PR反式激活中的共激活功能是必需的。其共激活蛋白活性可以通过YAP(Yes激酶相关蛋白)进一步增强，YAP还调节几种转录因子，例如p73(12)、Runx2(13)、TEAD/TEF(14)和ErbB4(15)。

我们以前的研究已鉴定WBP2为新的酪氨酸激酶底物，其在乳腺癌发展的MCF10AT模型中表现出差异性磷酸化(16)。随后证实外源表达的WBP2是EGFR的真实靶标。我们假设EGFR介导的WBP2的酪氨酸磷酸化在调节ERa功能和乳腺癌生物学中起作用。因此我们试图描绘EGFR介导的WBP2的酪氨酸磷酸化的信号传导途径并研究WBP2磷酸化对其共激活蛋白活性的影响。还研究WBP2及其酪氨酸磷酸化对ER阳性乳腺癌生物学的作用以及深层机制。

发明内容

因此，本发明的一方面包括一种检测患者的癌症的方法，所述方法包括以下步骤：

a)测量在分离自患者的第一样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量；以及

b)将样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量与分离自正常的非癌性细胞的第二样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量进行比较，

其中相对于第二样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量，第一样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量的增加指示在第一样品中存在癌症。

优选地，第一和第二样品中在Y192处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ED No.1的多肽的量还检测在SEQ ID No.1的多肽的Y231处酪氨酸的磷酸化，其中相对于第二样品中在Y192和Y231处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量，第一样品中在Y192和Y231处具有磷酸化的酪氨酸的SEQ ID No.1的多肽的量的增加指示在第一样品中存在癌症。

优选地，癌症是由EGFR、c-Src、c-Yes、ER、Wnt、WBP2或E2F表达或活性引起，或者起始于或依赖于EGFR、c-Src、c-Yes、ER、Wnt、WBP2或E2F表达或活性。