[发明专利]具有前导序列功能的多核苷酸

权利要求书

1.一种具有前导序列功能的分离的多核苷酸，其选自下组：

(a)多核苷酸，其包含核苷酸序列，所述核苷酸序列与SEQ ID NO:1或2具有优选至少60%，更优选至少65%，更优选至少70%，更优选至少75%，更优选至少80%，更优选至少85%，甚至更优选至少90%，且最优选至少95%序列同一性；

(b)多核苷酸，其与SEQ ID NO:1或2的多核苷酸在优选至少中等-高严格条件，最优选至少高严格条件，且甚至最优选至少非常高严格条件下杂交；

(c)SEQ ID NO:1或2的包含一个或多个(几个)核苷酸的取代、缺失和/或插入的变体。

2.权利要求1的多核苷酸，其包含或组成为SEQ ID NO:1或2的核酸序列，或其具有前导序列功能的片段。

3.权利要求1的多核苷酸，其具有SEQ ID NO:1或2的核酸序列。

4.一种核酸构建体，其包含至少一个第一核酸序列，所述第一核酸序列包含在第二核酸序列上游的启动子，所述第二核酸序列包含前述任一项权利要求的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于第三核酸序列，所述第三核酸序列编码感兴趣的多肽，并位于所述第二核酸序列的下游。

5.权利要求4的核酸构建体，其中所述包含于第二核酸序列的前导序列对于所述启动子是外源的。

6.权利要求4-5任一项的核酸构建体，其中所述启动子选自下组：NA2，任何来源于淀粉酶基因(葡糖淀粉酶、中性淀粉酶、酸性淀粉酶)的启动子，任何来源于蛋白酶基因(pepA、pepB、pepC、pepD、pepE)的启动子，任何来源于氧化酶基因(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、单氧化酶(mono-oxidase))的启动子，任何来源于编码糖酵解酶(烯醇酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、己糖激酶)的基因的启动子，任何来源于核糖体蛋白(核糖体蛋白、组蛋白)的启动子，或任何来源于编码热激蛋白、乙酰CoA乙酰转移酶、翻译延伸因子、CipC-样抗生素响应蛋白(CipC-like antibiotic response protein)、转化酶或外切菊粉酶(exo-inulinase)的基因的启动子。

7.权利要求4-6任一项的核酸构建体，其中所述前导序列组成为SEQ IDNO:1或2。

8.一种重组表达载体，其包含权利要求4-7任一项的核酸构建体。

9.一种重组宿主细胞，其包含权利要求4-7任一项的核酸构建体。

10.一种产生感兴趣的多肽的方法，其包括：(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求9的宿主细胞；和(b)回收所述多肽。

11.权利要求10的方法，其中所述宿主细胞是丝状真菌。

12.权利要求11的方法，其中所述丝状真菌选自下组：枝顶孢霉属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)、短梗霉属(Aureobasidium)、烟管霉属(Bjerkandera)、拟蜡菌属(Ceriporiopsis)、金孢子菌属(Chrysosporium)、鬼伞属(Coprinus)、革盖菌属(Coriolus)、隐球菌属(Cryptococcus)、Filibasidium、镰孢属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、梨孢菌属(Magnaporthe)、毛霉属(Mucor)、毁丝霉属(Myceliophthora)、新考玛脂霉属(Neocallimastix)、脉孢菌属(Neurospora)、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉属(Penicillium)、平革菌属(Phanerochaete)、射脉菌属(Phlebia)、瘤胃壶菌属(Piromyces)、侧耳属(Pleurotus)、裂褶菌属(Schizophyllum)、踝节菌属(Talaromyces)、嗜热子囊菌属(Thermoascus)、梭孢壳属(Thielavia)、弯颈霉属(Tolypocladium)、栓菌属(Trametes)和木霉属(Trichoderma)。