[发明专利]用于人多能细胞培养的简化基础培养基

权利要求书

1.一种无白蛋白培养基，所述培养基支持多能干细胞增殖。

2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基包含：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒、转铁蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持多能干细胞增殖。

3.一种用于培养多能干细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

将多能干细胞置于基质上；以及

使所述细胞接触无白蛋白培养基，所述培养基支持多能干细胞增殖。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养基包含：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒、转铁蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持多能干细胞增殖。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述基质包含层粘连蛋白。

6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述基质包含玻连蛋白。

7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，使所述细胞在低氧条件下接触所述培养基。

8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述多能干细胞是胚胎干细胞。

9.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述多能干细胞是诱导性多能干细胞。

10.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述多能干细胞是人细胞。

11.一种用于克隆多能干细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

在无白蛋白培养基中以克隆密度将多能干细胞铺板，所述培养基支持多能干细胞克隆。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述培养基包含：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒、转铁蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持多能干细胞克隆。

13.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述培养基还包含ROCK抑制剂。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述ROCK抑制剂选自HA100和Y27632。

15.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述培养基还包含肌球蛋白抑素。

16.一种冻存多能干细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

在无白蛋白培养基中冷冻多能干细胞。

17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述培养基包含：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒、转铁蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持多能干细胞增殖。

18.一种用于在限定条件下衍生诱导性多能干(iPS)细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

在无白蛋白培养基中重编程体细胞，所述培养基支持体细胞的重编程以衍生iPS细胞。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述培养基包含：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒、转铁蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持iPS细胞衍生。

20.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述重编程步骤包括使所述细胞接触TGF-β5～10天。

21.如权利要求20所述的方法，其还包括以下步骤：

在5～10天后移除TGF-β；以及

使所述细胞接触培养基，所述培养基基本由以下成分组成：

水、盐、氨基酸、维生素、碳源、胰岛素、FGF、硒和转铁蛋白。

22.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述重编程步骤包括使所述细胞接触氢化可的松。

23.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述重编程步骤包括使所述细胞接触丁酸盐。

24.如权利要求18所述的方法，其特征在于，在无异源条件下衍生所述iPS细胞。

25.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述体细胞是成熟体细胞。