[发明专利]稳定FSH

说明书

发明领域

本发明总体涉及稳定FSH制剂的领域，具体地涉及稳定液体FSH制剂的领域。通过加入盐，在优选的实施方案中，通过加入具有药用盐的碱金属阳离子的盐，即Na-盐或K-盐或其组合来实现稳定。

背景

促性腺激素是这样的激素家族，其基本上主要涉及雌性和雄性中的生育周期。促性腺激素可以来自尿液，用于研究和治疗目的，然而一些促性腺激素也可以重组产生。

具体地，促性腺激素可以用于治疗不育。

本文涉及并且都属于相同糖蛋白家族的四种主要的促性腺激素是促卵泡激素(FSH)、促甲状腺激素(TSH)、黄体生成素(LH)和绒毛膜促性腺激素(hCG)。所有这些促性腺激素由α和β亚基组成；α亚基是所有促性腺激素共有的，即对于所有上述四种促性腺激素是相同，而β亚基则在每一种中是不同的。

如上提及，促性腺激素是一组异源二聚糖蛋白激素，其调节雄性和雌性中的性腺功能。它们包括促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和(人)绒毛膜促性腺激素(hCG)

FSH天然由垂体前叶分泌并且功能是支持卵泡发育和排卵。FSH包括92个氨基酸α亚基(也是其他糖蛋白激素例如LH和hCG共有的)，和FSH独有的111个氨基酸的β亚基，其赋予激素生物学特异性(Pierce和Parsons，1981，Glycoprotein hormones：structure and function(糖蛋白激素：结构和功能)，Ann Rev Biochem.，50：465-495)。每个亚基通过加入复合碳水化合物残基来翻译后修饰。两个亚基携带用于N-连接聚糖连接的两个位点，α亚基在氨基酸52和78处而β亚基在氨基酸残基7和24处(Rathnam和Saxena，(1975)Primary amino acid sequence of follicle-stimulatinghormone from human pituitary glands.I.alpha subunit(来自人垂体的促卵泡激素的一级氨基酸序列.I.α亚基)，J Biol Chem(生物化学杂志).250(17)：6735-6746；Saxena和Rathnam，(1976)Amino acid sequence of the betasubunit of follicle-stimulating hormone from human pituitary glands(来自人垂体的促卵泡激素的β亚基的氨基酸序列)，J Biol Chem(生物化学杂志).251(4)：993-1005))。因此FSH被糖基化至约30质量％(Dias和Van Roey，(2001)Structural biology of human follitropin and its receptor(人促滤泡素及其受体的结构生物学).Arch Med Res.32(6)：510-519；Fox等(2001)Three-dimensional structure of human follicle-stiumulating hormone(人促卵泡激素的三维结构).Mol Endocrinol.15(3)，379-89).

从更年期后人尿液中纯化的FSH已经在不育治疗中使用了许多年；同时在自然生殖中促进排卵并且提供卵母细胞用于辅助生殖技术。FSH的两种重组形式，Gonal-F(Merck Serono)和Puregon(Schering-Plough)在90年代中期是可获得的。这些都在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达(Howles，C.M.(1996)，genetic engineering of human FSH(Gonal-F))(人FSH(Gonal-F)的遗传改造)，Hum Reprod(人类生殖).Update，2：172-191)。CG通常用于不育治疗，因为该化合物具有LH活性。