[发明专利]免疫刺激组合物和疫苗组合物

说明书

发明领域

本发明涉及含有甘露糖特别是甘露聚糖的碳水化合物聚合物，它们的制备及在免疫刺激组合物和疫苗组合物中的用途。 

发明背景 

已经表明甘露糖(例如，甘露聚糖)、β(1,3)葡萄糖(例如，葡聚糖)、β(1,4)乙酰化甘露糖(乙酰甘露聚糖)、β(1,4)N-乙酰基-葡糖胺(壳多糖)的几种多糖(碳水化合物聚合物)以及杂多糖例如鼠李糖半乳糖醛酸聚糖(果胶)刺激免疫系统。 

如吞噬作用、增殖反应、细胞因子释放以及其他的免疫系统活性增加所表明的，多糖与C型凝集素受体的结合诱导免疫刺激。由于这种免疫刺激活性，这些多糖已经被建议用于疫苗组合物。特别感兴趣的是甘露聚糖。 

甘露聚糖是由C型凝集素受体例如甘露糖受体(CD206)和DC-SIGN(CD209)识别的聚甘露糖。由于它们在抗原呈递细胞上的存在，已根据它们对含有甘露糖、岩藻糖或葡萄糖的化合物的摄取来表征这些受体。例如，甘露聚糖与甘露糖受体的结合诱导内吞作用，然后其递送入内体途径。对甘露糖基化抗原的早期研究表明，抗原上甘露糖残基的存在极大增强了树突细胞(DC)对抗原的摄取和II类主要组织相容性复合体(MHC)限制的抗原呈递。甘露聚糖与至少一种抗原的结合也增强其摄取和呈递。 

虽然知道某些多糖的免疫刺激性质已有一段时间，但是它们的使 用依然主要限于研究应用。这部分原因是控制其在临床环境使用，特别是关于人类的严格规定。因此，需要用于治疗或预防疾病的其他免疫刺激组合物和疫苗组合物及其可靠的制备方法。 

发明概述 

在努力设计用于制备具有治疗用途的可再现特性的、包含含有甘露糖的碳水化合物聚合物的组合物的方法时，本发明人惊讶地发现，一个具有确定大小和/或醛含量的甘露聚糖亚群与其他亚群和起始群体相比具有增强的性能。 

因此，在第一个方面，本发明提供了一种包含甘露聚糖的免疫刺激组合物，其中所述甘露聚糖的至少75%大于约1000kDa。 

在一个实施方案中，所述甘露聚糖是氧化的并因此包含醛基。这在甘露聚糖与至少一种抗原或其编码核酸结合时特别有用。 

在一个实施方案中，甘露聚糖在用氨基萘-1,3,6-三磺酸(ANTS)标记之后的大小分布基于蛋白标准物是约150Da至约250Da和/或基于碳水化合物标准物是约800kDa至约3000kDa。 

在另一个方面，本发明提供了一种包含氧化甘露聚糖的免疫刺激组合物，其中所述甘露聚糖的至少75%具有至少150个醛基。 

在另一个方面，本发明提供了一种包含氧化甘露聚糖的免疫刺激组合物，其中所述甘露聚糖的至少75%大于约1000kDa并且具有至少150个醛基。 

此外，提供了一种疫苗组合物，其包含甘露聚糖和至少一种抗原或其编码核酸，其中所述甘露聚糖的至少75%大于约1000kDa。 

在一个实施方案中，甘露聚糖是氧化的。 

在一个进一步的实施方案中，所述氧化甘露聚糖与所述至少一种 抗原共价结合。 

在一个替代实施方案中，所述氧化甘露聚糖通过聚阳离子与所述至少一种核酸结合。 

在一个实施方案中，所述氧化甘露聚糖的至少75%在与所述至少一种抗原或其编码核酸结合之前具有至少150个醛基。 

在一个实施方案中，甘露聚糖在与抗原或其编码核酸结合之前和用氨基萘-1,3,6-三磺酸(ANTS)标记之后的大小分布基于蛋白标准物是约150Da至约250Da和/或基于碳水化合物标准物是约800kDa至约3000kDa。 

甘露聚糖可以来自任何来源，例如真菌，更优选酵母。 

抗原可以来自任何来源，如病毒抗原、细菌抗原、原生动物抗原、真菌抗原、肿瘤抗原、自体抗原或变应原。例如，抗原可以是完整生物体、蛋白或抗原肽。 

在一个实施方案中，本发明的组合物被配制用于粘膜、局部、皮内、肌内、皮下或静脉内施用。 

在一个实施方案中，本发明的组合物还包含至少一种可接受的载体。 

在另一个方面，本发明提供了一种用于诱导和/或增强受试者免疫反应的方法，该方法包括给所述受试者施用本发明的组合物。 

在一个实施方案中，该方法包括施用至少一种抗原或其编码核酸。 

在一个实施方案中，甘露聚糖和至少一种抗原或核酸被依次或同时施用。在一个优选的实施方案中，它们在同一组合物中施用。 

在一个实施方案中，甘露聚糖和至少一种抗原或其编码核酸作为根据本发明的疫苗组合物施用。