[发明专利]包含额外的二硫键的人胰岛素

权利要求书

1.人胰岛素类似物，具有两个或更多个半胱氨酸取代，其中保留了人胰岛素的三个二硫键，并且

选择半胱氨酸取代的位点的方式使得引入的半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键的形成。

2.权利要求1的人胰岛素类似物，其中选择半胱氨酸取代的位点的方式使得

(1) 引入的半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键的形成，以及

(2) 人胰岛素类似物保留了与人胰岛素相关的期望的生物活性。

3.权利要求1或2的人胰岛素类似物，其中选择半胱氨酸取代的位点的方式使得

(1) 引入的半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键的形成，

(2) 人胰岛素类似物保留了与人胰岛素相关的期望的生物活性，以及

(3) 相对于人胰岛素和/或母体胰岛素，人胰岛素类似物具有增加的物理稳定性。

4.前述权利要求中任一项的人胰岛素类似物，其中选择半胱氨酸取代的位点的方式使得

(1) 引入的半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键的形成，

(2) 人胰岛素类似物保留了与人胰岛素相关的期望的生物活性，以及

(3) 人胰岛素类似物对蛋白水解性降解是稳定的。

5.前述权利要求中任一项的人胰岛素类似物，其中用半胱氨酸取代A-链的A10位的氨基酸残基，用半胱氨酸取代选自B-链的B1、B2、B3和B4的位置中的氨基酸残基，以及任选地缺失B30位的氨基酸。

6.前述权利要求中任一项的人胰岛素类似物，其中用半胱氨酸取代A-链的A10位的氨基酸残基，用半胱氨酸取代选自B-链的B3和B4的位置中的氨基酸残基，以及任选地缺失B30位的氨基酸。

7.前述权利要求中任一项的人胰岛素类似物，其中在A-链和B-链之间获得一个或多个额外的二硫键。

8.权利要求1-4或7中任一项的人胰岛素类似物，其选自：

A10C, B1C, desB30人胰岛素

A10C, B2C, desB30人胰岛素

A10C, B3C, desB30人胰岛素

A10C, B4C, desB30人胰岛素

A21C, B25C, desB30人胰岛素

A21C, B26C, desB30人胰岛素

B1C, B4C, desB30人胰岛素

A10C, B1C人胰岛素

A10C, B2C人胰岛素

A10C, B3C人胰岛素

A10C, B4C人胰岛素

A21C, B25C人胰岛素

A21C, B26C人胰岛素,和

B1C, B4C人胰岛素。

9.稳定人胰岛素的方法，包括用半胱氨酸残基取代人胰岛素或desB30人胰岛素的两个或更多个氨基酸，其中

a. 保留了人胰岛素的三个二硫键，以及

b. 选择半胱氨酸取代的位点的方式使得引入的半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键的形成，

从而产生人胰岛素类似物，其包含不存在于人胰岛素中的一个或多个额外的二硫键。

10.药物组合物，包含生物活性量的权利要求1-8中任一项的人胰岛素类似物和药学上可接受的载体。

11.在受试者中治疗糖尿病的方法，包括将权利要求1-8中任一项的人胰岛素类似物或权利要求10的药物组合物施用于受试者。

12.权利要求1-8中任一项的人胰岛素类似物，其用作高血糖症、2型糖尿病、损伤的葡萄糖耐受性和1型糖尿病的治疗或预防中的药物。

13.编码权利要求1-8中任一项的人胰岛素类似物的核酸序列，其衍生物，其部分序列，其简并序列或在严格条件下与之杂交的序列。

14.编码权利要求1-8中任一项的人胰岛素类似物的前体的核酸序列，其衍生物，其部分序列，其简并序列或在严格条件下与之杂交的序列。