[发明专利]一种DNA分子及重组质粒和大肠杆菌有效
申请号: | 201110459121.9 | 申请日: | 2011-12-31 |
公开(公告)号: | CN102660558A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 李岩;宫卫波;王秋岩;王静波;胡炎华 | 申请(专利权)人: | 通辽梅花生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12N15/63;C12N15/66;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/19 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 逯长明 |
地址: | 内蒙古自治*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 dna 分子 重组 质粒 大肠杆菌 | ||
1.一种DNA分子,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种重组质粒pKR-C,其特征在于,由质粒pKK223-3在其SmaI和HindIII酶切位点间插入如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA分子获得。
3.一种重组质粒pKTR-C,其特征在于,由以下方法制备:
以重组质粒pKR-C为模板,用核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的下游引物扩增,BamHI/SphI双酶切扩增产物,获得由Tac启动子、SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA分子、rrnB T1 Terminator终止子、rrnB Terminator终止子组成的片段,然后与经过BamHI/SphI双酶切的质粒pKK223-3-ThrA’BC连接即得;
其中,所述Tac启动子、rrnB T1 Terminator终止子位于片段两端,SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA分子位于Tac启动子、rrnB Terminator终止子之间,rrnB Terminator终止子位于SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA分子和rrnB T1 Terminator终止子之间。
4.一种大肠杆菌,其保藏编号为CGMCC No:5662,由重组质粒pKR-C转化大肠杆菌W3110获得。
5.一种大肠杆菌,其保藏编号为CGMCC No:5663,由重组质粒pKTR-C转化大肠杆菌W3110获得。
6.保藏编号为CGMCC No:5662的大肠杆菌在L-苏氨酸发酵中的应用。
7.保藏编号为CGMCC No:5663的大肠杆菌在L-苏氨酸发酵中的应用。
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