[发明专利]一种抗HER2或/和抗HER3抗体蛋白的纯化方法

权利要求书

1.一种抗HER2或/和抗HER3抗体蛋白的纯化方法，包括下列步骤：

a)澄清发酵液；

b)亲和层析；

c)酸性pH值病毒灭活；

d)阳离子交换层析；

e)阴离子交换层析；

f)病毒过滤；

其中所述酸性pH值病毒灭活步骤和病毒过滤步骤可随意穿插在亲和层析步骤后任一步骤位置。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述抗HER2或/和抗HER3抗体蛋白为抗HER2抗体蛋白。

3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述澄清方式为离心、深层过滤或终端微滤中之一或任意两种或两种以上组合。

4.根据权利要求3所述的纯化方法，其特征在于所述深层过滤为两级深层过滤，滤膜为Millipore公司D0HC和A1HC滤膜。

5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述亲和层析为蛋白A亲和层析。

6.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述蛋白A亲和层析的条件为流速：300±100cm/h；柱高：20±2cm；平衡缓冲液：25mM Tris-HCl+75mM NaCl，pH 7.2±0.2；洗脱液：100mM醋酸钠，pH 3.6±0.1。

7.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述酸性pH值病毒灭活步骤为加入20％乙酸，调整pH值到3.7±0.1，室温放置1-2小时，加入2M Tris调整pH值到5.2±0.2。

8.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述阳离子交换层析的条件为流速：100-180cm/h；柱高：20±2cm；预平衡缓冲液：100mM醋酸盐缓冲液加1M NaCl，pH 5.0±0.4；平衡缓冲液：50mM醋酸盐缓冲液，pH 5.2±0.2；洗脱液：260mM醋酸盐缓冲液，pH 6.0±0.2；样品pH为5.2±0.2，电导2.0-3.0mS/cm。

9.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于所述阴离子交换层析的条件为流速：180-360cm/h；柱高：20±2cm；预平衡缓冲液：50mM Tris-HCl加1M NaCl，pH 8.0±0.4；平衡缓冲液：50mM Tris-HCl加10mM NaCl，pH 8.0±0.2；样品：阴离子交换层析洗脱蛋白，调整pH到8.0±0.2，电导3.0-5.0mS/cm。