[发明专利]CYP2C19基因检测试剂盒及其扩增方法和检测方法

权利要求书

1.一种CYP2C19基因检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测基因CYP2C19rs4244285位点、rs4986893位点和rs12248560位点的引物。

2.根据权利要求1所述的CYP2C19基因检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测CYP2C19基因rs4244285位点的两个正向引物及一个反向引物、检测CYP2C19基因rs4986893位点的两个正向引物及一个反向引物和检测CYP2C19基因rs12248560位点的两个正向引物及一个反向引物。

3.根据权利要求2所述的CYP2C19基因检测试剂盒，其特征在于，所述检测CYP2C19基因rs4986893位点的引物碱基序列如下所示：

正向野生型引物：TTCCCACTATCATTGATTATTTCCCG

正向突变型引物：TTCCCACTATCATTGATTATTTCCCA

反向共用引物：TGAATCACAAATACGCAAGCAGTCAC

所述检测CYP2C19基因rs4986893位点的引物碱基序列如下所示：

正向野生型引物：CATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGG

正向突变型引物：CATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGA

反向共用引物：ATGTACTTCAGGGCTTGGTCAATATAG

所述检测CYP2C19基因rs12248560位点的引物碱基序列如下所示：

正向野生型引物：AAATTTGTGTCTTCTGTTCTCAAAGC

正向突变型引物：AAATTTGTGTCTTCTGTTCTCAAAGT

反向共用引物：ATAGCCTACTAAAAATACAGCAGCCTA。

4.一种权利要求1所述的CYP基因检测试剂盒所采用的检测方法，其特征在于，对受检样本DNA分别用野生型和突变扩增缓冲液进行扩增，在每个反扩增反应中同时对3个目的片段和1个内参片段进行扩增，扩增片段由大到小依次是：内对照733bp，rs12248560326bp，rs4244285217bp，rs4986893124bp；扩增后经凝胶电泳在紫外光下见到根据片段大小区分开的产物条带，根据条带的有无判断3个SNP位点的基因型。

5.一种采用权利要求1所述的检测CYP2C19基因检测试剂盒的多重PCR扩增方法，其特征在于，包括以下步骤：

预变性由1次循环构成，其条件为：温度为94℃，时间为5分钟；

PCR扩增由30次循环构成，其条件为：

变性：温度为94℃，时间为30秒；

退火：温度为58℃，时间为30秒；

延伸：温度为72℃，时间为90秒；

扩增结束后于4℃保存至电泳检测。