[发明专利]一种葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法无效
申请号: | 201110444547.7 | 申请日: | 2011-12-27 |
公开(公告)号: | CN103185761A | 公开(公告)日: | 2013-07-03 |
发明(设计)人: | 杨志强;王杏林;张俊伟;尹东东;宋丽明 | 申请(专利权)人: | 天津药物研究院 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300193 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 聚糖 凝胶 层析 测定 硫酸 长春新碱 脂质体 包封率 方法 | ||
1.一种葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法,包括如下步骤:
(1)取适量葡聚糖凝胶G-50,加适量去离子水室温溶胀至少24小时,待充分溶胀后,用大量去离子水洗涤至上层液澄清,将溶胀的葡聚糖凝胶G-50装入层析柱;
(2)取硫酸长春新碱脂质体适量上样于葡聚糖凝胶层析柱顶端,以去离子水为洗脱介质进行洗脱,收集脂质体部分,加适量10%的Triton-X 100溶液破膜,用水定量稀释,以HPLC法测定脂质体部分含硫酸长春新碱的量;
(3)取硫酸长春新碱脂质体适量,直接加适量10%的Triton-X 100溶液破膜,用水定量稀释,以HPLC法测定脂质体含硫酸长春新碱的总量;
(4)脂质体部分含硫酸长春新碱的量与脂质体含硫酸长春新碱的总量的比值即为硫酸长春新碱脂质体的包封率。
2.根据权利要求1所述的一种葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法,其特征在于所述的葡聚糖凝胶G-50为Pharmacia生产,其湿胶球的粒径规格为Medium,范围在100~300微米。
3.根据权利要求1或2所述的葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法,其特征在于,所述的HPLC法的色谱条件如下:
色谱柱:为Diamonsil C18(200mm×4.6mm×5μm);
流动相:甲醇∶水∶三乙胺体积比为70∶30∶0.5;
检测器:紫外检测器。
4.根据权利要求3所述的葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法,其特征在于,所述紫外检测器检测波长为297nm。
5.根据权利要求3所述的葡聚糖凝胶层析法测定硫酸长春新碱脂质体包封率的方法,其特征在于,所述流动相pH值为7.0。
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